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革兰氏染色及镜检操作规范培训 质量管理部 目录 一、革兰氏染色法 二、革兰氏染色原理 三、仪器设备、试剂 四、操作方法 五、镜检及结果判定 六、革兰氏染色图片 七、革兰氏染色注意事项 八、革兰氏染色小结 一、革兰氏染色法 革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，1884年由丹麦医师Gram创立。 二、革兰氏染色原理 G+菌由于其细胞壁较厚，肽聚糖网层次多且交联程度大，故经酒精脱色，失水而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故酒精处理，能把结晶紫和碘的复合物牢牢留在壁内，使其保持紫色。 三、仪器设备、试剂 生物显微镜 载玻片 草酸铵结晶紫染色液 革兰氏碘液 沙黄复染液或番红染色液 95%乙醇 5、革兰氏染色液配制 5.1草酸铵结晶紫染液 A液：结晶紫2g?，95%乙醇20mL。 B液：草酸铵0.8g，?蒸馏水80mL?????? 混合A液及B液，静置48h后使用。 5.2碘液配制 碘片1g，?碘化钾2g?，蒸馏水300mL?????? 配制方法：先将碘化钾溶解在少量水中，再将碘片溶解在碘化钾溶液中，待碘全溶后，加够蒸馏水即可。 5.3番红复染液配制 番红2.5g，?95%乙醇100mL??????? 取上述配好的番红乙醇溶液10mL与80mL蒸馏水混匀既成。 四、操作方法 1、制片 在干净的载玻片上滴上一滴蒸馏水。 用接种环进行无菌操作，挑取培养物