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天然药化实验指导
实验二 芦丁酸水解制备槲皮素
芦丁及槲皮素的结构
实验目的:
1.掌握芦丁酸水解的操作方法与原理
2.熟悉槲皮素的重结晶方法
3.掌握槲皮素与糖的薄层鉴定方法
实验原理:
根据芦丁苷在酸性条件下水解,生产苷元和糖
实验步骤:
一、芦丁的酸水解
称取精制芦丁约2 g,研细,加H2SO4150 ml,投入500 ml锥形瓶中,放沸石,直火沸腾后,保持2小时,放冷后抽滤,滤液保留作糖份的鉴定,水洗沉淀后,粗品用95%乙醇大约20 ml回流溶解,趁热过滤,放置,加水至50%左右浓度,得黄色针晶。
糖的鉴定
1.层析鉴定:取水解母液20 ml,于水溶上加热,同时于搅拌下加BaCO3细粉中和至中性,滤BaCO3后,滤液在水浴上浓缩至2~3 ml,得样品液,以葡萄糖和鼠李糖标准品作对照。
展开剂:正丁一醋酸一水(BAW)(4:1:5)上层,上行展开。
显色剂:苯胺一邻苯甲酸试液,喷后105 ℃烘10分钟。显棕红色斑点。
芦丁和槲皮素的薄层层析鉴定
吸附剂:青岛硅胶G(10~400)以0.4 %CMC-Na水液制板,105 ℃活化1小时。
展开剂:(1)CHCL3-MeOH-HCOOH(15:5:1)
(2)CHC3-丁酮-HCOOH(5:3:1)
显色剂:1% FeC3和1% K3[Fe(CN)6]水溶液,应用时等体积混和。
芦丁酸水解流程图
实验三 大黄中游离总蒽醌的分离实验四 柱色谱实验技术
一、目的要求
掌握柱色谱的分离原理
掌握常压硅胶色谱柱的装柱、上样操作
掌握色谱技术中洗脱剂选择的原则
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