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如何凝练研究的技术路线
(Reading of Results)
艾 静
哈尔滨医科大学药学院药理教研室
Reading of results
2. 分析文章设计的技术路线
(1) 目的明确
(2) 实验方法准确
(3) 具有逻辑性
Reading of results
Over-expression of microRNA-1 impairs
cardiac contractile function by damaging
sarcomere assembly
Reading of results
1. 明确研究的目标
心脏过表达miR-1是否可以引起心脏收缩力的下降:
在体水平观察
Tg模型构建
正常C57BL /小鼠 心脏过表达miR-1C57BL /小鼠
功能检测 形态检测
PV loop或小动物超声 电镜
HE
EF ;ESP ;EDP ;
dp/dt max ;dp/dt min ; 心脏大小
PRSW ;Tau 肌丝结构
Reading of results
2. 寻找与miR-1相关的靶蛋白并证明调控关系
Reading of results
2. 寻找与miR-1相关的靶蛋白并证明调控关系
离体水平证明
靶点调控验证 功能验证
数据库预测 荧光素酶报告基因 过表达或下调miR-1验证
技术(HEK293T细胞) (原代培养的神经元细胞)
CaM 电镜, HE Western
CaM
cMLCK
cMLCK 肌丝结构 CaM
cMLCK
CaMKII
MLCK2v
cMYBP-C
Reading of results
3. 在体证明miR-1参与心功能的调控
抑制心脏过表达miR-1是否可以逆转心脏收缩力的下降:
在体水平观察
LNA
正常小鼠 Tg 小鼠 T
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