血型鉴定、交叉配血中若干1 ppt课件.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * 凝聚胺原理 红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发性聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕，而形成Zeta电位， Zeta电位决定红细胞之间的排斥作用。 凝聚胺技术首先利用底离子溶液（LIM），降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。 其后，加入凝聚胺（Polybrene）溶液，它是一种高价阳离子多聚物，肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Zeta电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的凝聚。最后，加入悬浮液（Resuspending），Resuspending具有中和凝聚胺（Polybrene）阳离子的作用，使正常的红细胞非特异性凝聚散开，试验结果为阴性，但如果红细胞被应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验结果为阳性。 * 凝聚胺法 1、取3支试管分别标记（主、次、混） 2、5%红细胞制备：取25ul样本压积红细胞悬浮于500ul生理盐水中。 3、主侧：受血者血浆2滴+5%供血者红细胞1滴。 4、次侧：供血者血浆2滴+5%受血者红细胞1滴。 5、将主侧管和次侧管所加的所有成分都加入混合管中。 6、主侧管、次侧管、混合管中各加入低离子介质溶液600ul,混合均匀，室温放置1分钟。 7、再分别向3管中加入凝聚胺溶液2滴混合均匀，室温放置15秒钟。 8、置离心机内3400rpm/15秒，倒去上清液，使管底保留约0.1ml的液体。 9、目测管内有无红细胞凝集块，若没有凝块，则必须重做。 10、向红细胞已发生凝集的试管内加入2滴复悬液，轻轻混匀，显微镜下观察结果（红细胞凝块散开为阴性反应，示血交叉配型相合；若红细胞仍凝集成块为阳性反应，示血交叉配型不合。 * 可引起血清学问题的一些临床疾病 DAT阳性 类风关 多凝集现象 细菌感染 A/B抗原表达减弱 白血病 ABO异常 卵巢囊肿 获得性B抗原 细菌感染、结肠癌、肠梗阻 Kell血型系统抗原抑制 慢性肉芽肿病 溶血 PNH、红细胞酶缺乏、过度加热 温性自身抗体 癌、HLE 冷性自身抗体 冷凝集素疾病、淋巴瘤、梅毒、病毒感染 * 可引起血清学问题的一些临床疾病 串钱状凝集 多发性骨髓瘤 ABO同种抗体缺乏或减弱 低（无）丙种球蛋白血症 免疫性ABO抗体 新生儿、妊辰 自身（同种）抗N 血液透析病人 HLA抗体 经产妇、移植病人、多次输血者 ABO同种抗体的缺乏或减弱 3岁新生儿 ﹥70岁老年人 * 药物的使用与血型血清学疑难问题 假凝集 血浆扩张剂 串钱状凝集 右旋糖酐 混合外观红细胞 输异型红细胞、骨髓（最近或过去） 获得额外抗原 同上 DAT阳性 输注/注射免疫球蛋白 意外的同种抗体 输注含同种抗体的血浆、 输注过免疫球蛋白