牙龈卟啉单胞菌菌毛蛋白fimA基因在大肠杆菌中的融合表达和纯化（二）的论文(范本).docVIP

牙龈卟啉单胞?菌菌毛蛋白f?imA基因在?大肠杆菌中的?融合表达和纯?化（二）的论?文 牙龈卟啉?单胞菌菌毛蛋?白fimA基?因在大肠杆菌?中的融合表达?和纯化（二）?的论文 5）?金属螯合亲和?层析用于蛋白?质的复性 在?基因工程技术?中，表达的重?组蛋白多以包?涵体形式存在?，蛋白质经常?会错误折叠而?丧失活性，这?一难题长久以?来都没有得到?很好的解决。?高浓度的变性?剂可以溶解包?涵体，然后控?制变性剂除去?的速度，有时?需要添加适当?的氧化/还原?试剂，蛋白质?可以逐步折叠?复性。通常使?用的复性方法?有三种，分别?是稀释复性、?透析复性和层?析复性。 ? （1）稀?释复性：直接?把溶解的蛋白?质稀释于复性?缓冲液中。这?种方法操作简?单，适于小规?模使用，但只?适于浓度极低?的蛋白质复性?，否则会有大?量聚集体形成?。 （?2）透析复性?：采用透析膜?通过逐渐降低?外透液浓度来?控制变性剂去?除速度。这种?方法速度慢、?耗时长，不适?合大规模使用?，有时易形成?无活性蛋白聚?集体。 ? （3）层析?复性：使蛋白?质可逆吸附在?固相介质上，?例如离子交换?层析介质、金?属螯合亲和层?析介质等，可?以避免伸展的?多肽分子之间?形成聚集体。?金属螯合亲和?层析(ima?c)是一种有?效的纯化和复?性蛋白质的层?析方法。在高?浓度变性剂存?在的情况下，?组氨酸尾仍