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差异的控制 三、固有动物之间的差异 动物之间除了遗传组成的差异外,许多其他方面的影响也能增加动物间的差异,是我们进行试验设计时需要加以重视和考虑的差异来源。 1、动物来源不同 2、动物饲养管理的差别 3、动物生活环境的不同: 4、动物健康状况 温度:排气口的温度高3~4度 湿度:排气口湿度高5%~10% 光线:不同层面,感受光线不同 声音:20~40HZ,交配推迟,产仔低 垫料:松木和桉木可以引起大动物肝脏酶活性和细胞毒效应的物质。 差异的控制 四、动物与环境之间相互作用引起的差异 1、动物对环境应激或应激的生理反应、行为反应和生化反应 使用环境丰富物,增加生存环境的复杂性,减少应激。 2、群居 群居体重差异小,等级明显,丰富物(改善还是恶化) 差异的控制 四、动物与环境之间相互作用引起的差异 3、动物与实验操作过程之间相互作用诱发产生的差异是存在的 动物对不同饲养者表现不同,人员保持一致 实验时间和饲养程序的之间的关系:更换笼盒前后给药不同效果,给药顺序不同,同样引起差异 动物发出信号 控制这类差异最有效的方法: A: 确保操作人员的熟练程度 B: 开始实验前动物适应过程 动物实验设计的内容和步骤 一、实验设计的最初步骤 1、查阅文献 A: 明确研究焦点 B:明确方法 C:明确模型 D:评估实验 2、科研方法 A:观察和描述科研中的现象 B:系统的陈述问题和解释问题的假说 C:利用假说预测新的观察结果 D:验证假说 动物实验设计的内容和步骤 一、实验设计的最初步骤 3、问题的陈述、研究的目标和提出假说 问题提出:实验将说明的问题是什么,意义 研究目标:总目标,特殊问题 假 说:对每一个至少给出两个预计结果 动物实验设计的内容和步骤 一、实验设计的最初步骤 4、动物模型的确定 使用系统发育水平最低的动物,符合3R原则 使用的动物具有研究要求种属或品系专一特点,特定研究目的必须特点 实验期间动物模型维持条件 动物模型来源渠道 最终确定动物模型前征询实验动物兽医意见 动物实验设计的内容和步骤 一、实验设计的最初步骤 5、实验合作者的确定 在研究的过程中,明确应用的试验技术操作,并确认具有相应操作专长的人员来完成。 让合作者了解实验:设计、计算、样品收集.... 实验动物中心可以提供动物实验有关技术操作培训及昂贵设备服务 动物实验设计的内容和步骤 二、动物实验设计 1、研究方案 根据问题、目标、假说,提出实验操作安排的计划并文字化 考虑的方面: A:动物模型持续时间 B: 模型中预期疾病的进程(决定测定的最适时间点) C:人员参加的时间,实验花费 D:给药方法 E:风险评估 F:统计学方法选定 动物实验设计的内容和步骤 二、动物实验设计 2、实验单元 可以是一个动物,也可以是一组动物群体 3、N因子;实验组别的动物只数 将适当数量的动物分配到每一个实验组别 每一个实验组别动物数量是通过预期各组接过差异的可能程度和采用统计学的方法计算出来的 一个标准笼盒能够容纳动物的数量 动物实验设计的内容和步骤 二、动物实验设计 4、对照 过多的变量(如遗传、环境、感染因子)对动物试验的结果产生影响,因此为消除这些外来变量或可能存在的未知变量的影响而设置对照动物。 对照种类: 阳性对照 阴性对照 空白对照 媒介物对照 比拟物对照 动物实验设计的内容和步骤 二、动物实验设计 阳性对照: 一般在阳性对照组希望有变化 作用:作为一个标准,测量各实验组间差异的程度。 例如:毒物试验,动物给予毒物作为对照,结果是产生损伤或变化 阴性对照: 期望有正常状态不产生变化 作用:保证未知变量对实验组动物引起相反的效应不存在,即排出假阳性 二、动物实验设计 空白对照 模拟处理组的过程而实际上没有给予动物以受试物或处理。 移植或损伤 媒介物对照 在测试化合物溶于一种媒介时,这种媒介需要对照 作用:观察溶剂是否引起反应 比拟物对照 与阳性对照性质一样,使用一个已知的处理来对比待测的处理 例如:药物治疗,使用一种已知临床药物,对比实验药物。 动物实验设计的内容和步骤 二、动物实验设计 5、动物分组的随机化 动物实验时必须把动物随机分配到实验各组,以确保研究的变量在每一组中不会导致偏差数据。 必须在选择的时候选定同源的动物群体,生物学特性一致的动物 方法: A:每一只动物一个编号,1第一组,2 第二组………暗箱抽取 B: 动物多可以利用数字随机或计算机程序随机 动物实验设计的内容和步骤 样本大小的确定
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