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年整理第二节 支气管肺泡灌洗液检查.doc
第二节 支气管肺泡灌洗液检查
痰液检查虽可对呼吸道疾病的诊断提供帮助,但不够灵敏与特异且对疾病定位帮助不大。支气管肺泡灌洗术(bronchoalceolar lavage,BAL)中在纤维支气管镜基础上发展起来的一项新技术。BAL是应用纤维支气管镜进行支气管肺泡灌洗,采取肺泡表面衬液进行炎症与免疫细胞及可溶性物质检查的方法。与支气管冲洗少量液体注入支气管信灌注大量的液体进行支气管肺泡灌洗不同,利用支气管肺泡灌洗液进行细胞学、微生物学、寄生虫学和免疫学等方面的各项检验,对一些下呼吸道疾病和诊断、病情观察和预后判断开辟了一条新途径。
支气管肺泡灌洗术分全肺灌洗和肺段亚肺段灌洗。前者多用于治疗,后者多用于采集检验标本。
一、标本采集和处理
通常于局部麻醉后将纤维支气管镜插入右肺中叶或左肺舌段的支气管,将其项端契入支气管分支开口,经气管活检孔缓缓少入37摄氏度灭菌生理盐水,每次30-50毫升,总量100-250毫升,不应超过300毫升。每次注液后以-13.3~-19.95kpa负压吸出,要防止负压过大,过猛。分别收集于用硅油处理进的容器中,容器周围宜用冰块包围,并及时送检。记录回收液量,至少应回收30-40%以上,BALF方能进行分析。分别注入的液体每次回收后混合一起进行试验。第一份回收的标本往往混支气管内成分,为防止其干扰,也可将第一份标本与其它标本分开检查。首先用单层纱布过滤以除去粘液,将滤液离心后分离上清液供生化检查和免疫学测定,沉淀物供细胞检查。微生物学检查的标本须严格遵守无菌操作;合适的BALF应要求:①达到规定的回收比例;②不混有血液,红细胞数小于10%;③不应混有多量的上皮细胞(一般小于3%)。
二、细胞学检查
1.有核细胞计数和分类计数:计数除上皮细胞及红细胞以外的所有细胞,经每毫升回收液的细胞总数表示。细胞分类可用沉淀物制定涂片或用细胞离心器进行,正常非吸烟者BALF细胞数见表13-1,正常人的BALF含有核细胞为(5-10)×106/L。
2.淋巴细胞亚群分析:BALF中淋巴细胞增多,可用单克隆抗体进行淋巴细胞亚群分析。例如CD3、CD4、CD8、HLA-DR等以有助于发病机制的研究。正常人非吸烟者 BALF中淋巴细胞表面抗原表型见表13-2。
3.癌细胞:支气管肺癌患者的BALF沉淀物检出癌细胞,有助于肺癌诊断。
表13-1 正常非吸烟者BALF细胞
作者 年 例数 注入量 回收量( %) 总细胞数(×
106) 细胞(× 106/ml) Mac Lym Neut Eos Hunninghske 1983 8 100 52 14 .0 26 .9 93 7 0 0 北医大三院 1987 10 150 62 13 .4 14 .7 86 13 0 .9 0 .05 Ettensohn 1988 78 120 63 7 .3 9 .4 95 4 1 0 注:Mac巨噬细胞; Lym淋巴细胞;Nuet 中性粒细胞;Eos 噬酸性细胞
表13-2 正常非吸烟者 BALF中淋巴细胞表面抗原表型
作者 年 例数 淋巴细胞( %) 总 -?/FONTT TH TS H :S B 细胞 Yamada 1986 25 13 .8 63 .0 45 .4 25 .3 1 .90 5 .3 Wallaert 1987 12 7 .7 66 .4 48 .4 27 .5 1 .8 ?/FONT 三、可溶性物质检查?
BALF离心液的上清液中含有复杂的可溶性成份,例如各种蛋质、酶类、脂类等(表 13-3)。这些成分的来源有:①被动漏出者(如白蛋白、血清类粘蛋白);②主动转运者;③局部产生分泌成分。这些物质反映肺泡表面衬液成份,其测定对了解某些肺部疾病的病变特征,研究发病机制提供重要手段。
表13-3 BALF检测的可溶性物质
溶质 浓度近似值 溶质 浓度近似值 总蛋白 70 μg/ml 纤维连接蛋白 30-150ng/ml 白蛋白 70 μg/ml 白细胞弹性蛋白酶 + 免疫球蛋白 胶原酶 + IGG 2.5-10 μg/ml 血管紧张素转换酶 + IGA 2.5-6 μg/ml 极性脂质 78 μg/ml IGM 100ng/ml 非极性脂质 45 μg/ml IGE 0.06-0.3 μg/ml 前列腺素 E 200-2000pg/ml α?1-抗胰α蛋白酶 1-2 μg/ml 血栓素 B 25-85pg/ml α?2-巨球蛋白 0.04 μg/ml 癌胚抗原 0.8ng/ml 转铁蛋白 4 μg/ml 四、微生物学检查?
1.涂片 BALF不像痰液那样易受上呼吸道杂菌的污染,也不含气管和左右大支气利害的分泌物,含非病原性阿菌很少,故其涂片检菌的意义较大。取 BALF沉淀物进行
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