细胞核微量制备试剂盒nucleiminiprepkit-天恩泽.pdfVIP

细 CAT# ：100601-50 常温运输和保存 胞 生 物 学 系 列 细胞核微量制备试剂盒 Nuclei Miniprep Kit 使用手册V1.0 北京天恩泽基因科技有限公司 北京市海淀区上地信息路26 号北京市留学人员海淀创业园中关村创业大厦506 网址： ；电话：400-6765278 ；电邮：order@ 原理及特点 用高密度介质来分离动物软体组织 （如肝脏、脾脏等）细胞核是目前主 流的方法，它是由Chauveau 于 1956 年发明，其原理是细胞核的密度较大， 在高速离心条件下 （40 000g 1 小时）可在高密度介质（2.2mol/l 蔗糖溶液） 中沉降下来，从而达到与细胞质其它成分分开的目的。该方法能通过一步离 心得到较高纯度的细胞核，得到广泛应用。本产品就是在Chauveau 方法的 基础上优化改进而来，它具有下列特点： 1. 基于密度梯度分离，可有效去除细胞质及其他细胞器，得到的细胞核纯净， 2. 加进氯化钙、氯化镁、氯化钾等改变分离介质渗透压的物质，减少了细胞 核的脆性，增加了细胞核的完整性。 3. 精心调节了介质的pH ，防止细胞核在分离过程中的聚集，还能保持细胞 核的精细结构 4. 快速，整个操作过程仅需 1 小时即可完成 （对一个样品而言）。 5. 提供染色试剂，可以在普通光学显微镜下检测纯化的细胞核的纯度。 6. 处理温和，得到的细胞核中的大部分蛋白质都具有活性，可以用于胶迟阻 实验、酶活性分析细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等的研究；也可 用于超大片段DNA 的纯化。 7. 不但适用于动物和植物培养细胞，还能用于实体组织（能用Dounce 或 Potter 匀浆器匀浆的组织均可）。 8. 一次微量提取足够处理0.1 克组织或10E7 个培养细胞，本产品足够50 次微量提取。 规格及成分 成 份 编 号 50 次包装 溶液A 成分一 100601A1 100 mL 溶液A 成分二（干粉） 100601A2 约20 g 溶液B 成分一 100601B1 50 mL 溶液B 成分二（干粉） 100601B2 约 100 克 细胞核染色液 1 套 使用手册 100601sc 1 份 运输及保存 常温运输和保存，有效期一年 自备试剂 手动或电动Dounce 或Potter 组织匀浆器 （研磨杵和套管的空隙最好为0.1 mm ，如果小于细胞核的直径，则会使细胞核破裂）、水平式低温高速离心机、 光学显微镜。 使用方法 一、准备工作：先将溶液A 的成分二（干粉）全部加入到溶液A 成分一（溶 液）中，摇晃溶解后得到 100mL 溶液A 。