生物化学课件第02章1.pptVIP

第五章 核酸化学 第一节 核酸的概述（染色体和基因） 第一节 核酸的概述（核酸的研究史） 第一节 核酸的概述（核酸的种类） 第一节 核酸的概述（核酸的分布） 第一节 核酸的概述（核酸的功能） 第二节 核苷酸(总） 第二节 核苷酸(1戊糖） 第二节 核苷酸(2碱基1） 第二节 核苷酸(2碱基2[嘧啶1]） 第二节 核苷酸(2碱基3[嘌呤1]） 第二节 核苷酸(2碱基3[嘌呤2]） 五种碱基都能形成酮式-烯醇式或氨基-亚氨基的互变异构。这两种异构体的平衡关系受介质酸碱环境的影响。 第二节 核苷酸(3核苷1） 第二节 核苷酸(3核苷2） 第二节 核苷酸(4核苷酸1） 第二节 核苷酸(4核苷酸2） 第二节 核苷酸(4核苷酸3） 第二节 核苷酸(4核苷酸4） 第二节 核苷酸(5多磷核苷酸2） 第二节 核苷酸(5多磷核苷酸1） 第三节 核酸的结构 一、DNA的结构1(总） （一）DNA的一级结构1 连接键 （一） DNA的一级结构3(线条缩写) （一）DNA的一级结构4(字母简写) （二）DNA的二级结构1(总) （二）DNA的二级结构2 （二）DNA的二级结构3 1．DNA双螺旋结构模型要点1（1） 1．DNA双螺旋结构模型要点1（2） 1．DNA双螺旋结构模型要点2（1） 1．DNA双螺旋结构模型要点3 1．DNA双螺旋结构模型要点3 1．DNA双螺旋结构模型要点4 2．双螺旋结构的稳定因素1 2．双螺旋结构的稳定因素2 3．DNA双螺旋的不同类型1 3．DNA双螺旋的不同类型2 （四）DNA的三结构 二、 RNA的分子结构1 （一）RNA一级结构 （二）RNA的碱基组成 （三）RNA的类型（ rRNA 1） （三）RNA的类型（ rRNA 2） （三）RNA的类型（mRNA1） （三）RNA的类型（tRNA） （四）RNA的二级结构1(总) （四）RNA的二级结构2(1) （四）RNA的二级结构2(2) （四）RNA的二级结构2(3) （四）RNA的二级结构2(4) （四）RNA的二级结构2(5) （四）RNA的二级结构2(5) （五）RNA的三级结构1 （五）RNA的三级结构2 第四节 核酸的理化性质 二 核酸的变性、复性与杂交 （1）、变性1 （1）、 变性2 （1）、变性3（Tm值1） （1）、 变性3（Tm值2） （1）、变性3（Tm值3） （1）、变性3（Tm值4） （1）、变性3（Tm值5） （2）、复性1 （2）、复性2 （2）、复性3（影响因素） （3）、核酸的杂交1 （3）、核酸的杂交2 A核酸研究的主要工具酶 a．核糖核酸酶类（RNA酶类1） b脱氧核糖核酸酶类（DNA酶1） B 核酸的杂交技术1 B核酸的杂交技术2 B核酸的杂交技术3（1） B核酸的杂交技术3（2） B核酸的杂交技术3（3） tRNA的三级结构2 一、核酸的一般理化性质 核酸为多元酸，具有较强的酸性； DNA是线性高分子，粘度极大； 在260nm波长有最大吸收峰，是由碱基的共轭双键决定的。这一特性常用作核酸的定性、定量分析。 1. DNA或RNA的定量 OD260=1.0相当于 50 ?g/ml双链DNA 40 ?g/ml单链DNA（或RNA） 20 ?g/ml寡核苷酸 2.判断核酸样品的纯度 DNA纯品: OD260/OD280 = 1.8 RNA纯品: OD260/OD280 = 2.0 OD260的应用 OD-- optical density（光密度）的缩写， 表示被检测物吸收掉的光密度 （1）、变性 （2）、复性 （3）、杂交 定义：指核酸双螺旋区氢键断裂，变成单链，它并不涉及共价键（磷酸二酯键）的断裂。 变性因素：热变性、酸碱变性等。 通常把DNA的双螺旋结构失去一半时的温度称该DNA的溶点或溶解温度，用Tm表示，DNA的Tm值一般在70－850C之间。 变性的相对量 温度0C 60 80 100 1.0 1.2 1.4 1.6 0 Tm Tm Tm 100% Poly d(A-T) Poly d(G-C) DNA Tm值的大小与下列因素有关： （1）DNA的均一性 （2）G-C含量 （3）介质中的离子强度 影响Tm值大小的因素1 （1）离子强度 I低是，变性温度低， 纯水中，常温下就会变性 （2）G-C含量：G-C含量越高，Tm值越大，Tm与G-C含量成正比关系。因为G-C比A-T更稳定（氢键）。Tm与所含G-C的多少的关系，可用经验公式计算不同DNA的Tm： （G＋C）％＝(Tm－69.3)×2.44 （3） 溶液的pH值 高的pH下， 碱基去质子， 而失去形成氢键的能力 （4）变性剂 尿素， 甲酰胺等可破坏氢键。