反义htert寡核苷酸对胰腺癌bxpc-3细胞增殖和端粒酶活性的影响.pdfVIP

中文摘要 实验目的 胰腺癌是消化系统相对少见的恶性肿瘤，但近年来其发病率有明显增 长的趋势。在美国，胰腺癌的年龄调整死亡率从1920年的2．9／10万人121 会，1988)。我国胰腺癌的发病率有上升趋势，手术切除率也可望提高，然 而5年生存率则仍在5％左右。因此，在胰腺癌早期诊断方法尚未有突破 的情况下，对胰腺癌中晚期病人，采用合理的综合治疗，提高病人的生存期 和改善生活质量是现阶段临床外科医生应关注的问题。 端粒是真核线形染色体末端结构，由端粒DNA和端粒结合蛋白组成。 —20kb。端粒长度的维持需要端粒酶的激活。端粒酶能以端粒3’端为引 物，以其RNA组分为模板，人类端粒酶是有多个亚单位构成的核糖核蛋白， 无表达。Zhou JH等报道癌症的发生和端粒酶活性之间有相关性，并且 癌的发生过程中有重要作用。 由于端粒酶与恶性肿瘤具有高度相关性，肿瘤细胞经化疗杀伤或诱导 分化后端粒酶活性显著的降低，其机理尚待阐明，但提示人们，针对端粒酶 活性的药物可能为治疗肿瘤提供新的途径。故端粒酶抑制剂被认为是一种 颇具潜能的抗肿瘤因子。并且端粒酶是肿瘤治疗很具特异性和普遍性的新 靶点，以抑制端粒酶活性为目的的基因治疗j通过下调端粒酶活性达到抑制 肿瘤细胞增殖，可望成为治疗恶性肿瘤的有效途径。本研究采用针对端粒 酶催化亚单位hTERT基因的反义寡核苷酸，研究反义寡核苷酸对胰腺癌细 疗靶点的可能性。 实验方法 本实验采用tTr法检测不同剂量反义寡核苷酸不同时间对细胞Bxpc 胞仪检测对细胞DNA含量的分布。 统计学方法：数据用均数±标准差表示，运用SPSS软件采用t检验和 重复测量的方差分析进行组间均值比较。 实验结果 正义寡核苷酸组与对照组的吸光度值之间无差异(F=0．013，P0． 05)，说明正义寡核苷酸作用组对细胞正常生长无影响。对照组与反义寡 核苷酸的作用时间和剂量问有依赖关系，即吸光度值随着反义寡核苷酸的 作用时间和剂量的增加而减少。反义寡核苷酸的抑制率不同浓度间有差异 即抑制率和反义寡核苷酸的作用时间及剂量间有依赖关系，也就是说抑制 率随着反义寡核苷酸的作用时间和剂量的增加而增大。 6Ixmol／L的端粒酶反义寡核昔酸作用细胞72小时后，对照组与反义寡 对照组和反义寡核苷酸作用组问端粒酶活性分别为：1．209±0．308对o． 制率为63％。 结 论 通过本实验，可以得到如下结论： 1．反义寡核苷酸作用细胞后，细胞生长受到抑制，并出现调亡。 ·2· 2．抑制率和反义寡核苷酸的浓度和作用时闻呈直线关系(F=11．633， 用时间的增加而增大。 3．反义寡核苷酸作用细胞后，靖粒酶活性受刭抑制，抑封率为63％。 关键词：端粒酶；基因；寡核苷酸；细胞增殖；凋亡 ·3· Cell And Cx珊icerTelomerase of Pancreatic Activity Inhibition Bxpc—．3 Anfinosense oIil；0血棚哪咖d|et出de CellGrowth Phosphorothioate by isa tumorinthe carlcer little Pancreatic malignant digestives