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专题2 《细胞工程 》 2.1植物细胞工程 §2.1.1植物细胞工程的基本技术 植物组织培养就是在无菌和人工控制条件下,将离体的植物器官、组织、细胞,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产生愈伤组织、丛芽,最终形成完整的植株。 探究: 1、为什么已分化的植物组织或细胞能培养成完整植物体? 探究: 1、克隆羊“多利”的诞生说明了什么? 2、生物体内的细胞为什么没有表现出全能性,而是分化成不同的组织器官? 1、有关全能性的表述中,不正确的是 A.受精卵在自然条件下能使后代细胞形成完 整个体,因此全能性最高 B.生物体内细胞由于分化全能性不能表达 C.卵细胞和受精卵一样,细胞未分化,全能 性很高 D.在一定条件下,植物细胞离体培养能表现 出全能性 2.下列植物细胞全能性最高的是( )A.形成层细胞 B.韧皮部细胞 C.木质部细胞 D.叶肉细胞 3.下列细胞全能性最高的是( ) A.植物的卵细胞 B.植物的精子细胞 C.被子植物的受精卵 D.被子植物的的叶肉细胞 培养室 愈伤组织的形成 试管苗 植物组织培养就是在无菌和人工控制条件下,将离体的植物器官、组织、细胞,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产生愈伤组织、丛芽,最终形成完整的植株。 2 、植物组织培养的培养基 无机营养成分:C,H,O大量元素及部分微量元素 有机营养成分 ① 含N物质:包括维生素和氨基酸 ② 碳源:2%—5%的蔗糖 ③ 琼脂:起支持作用 ④ 相关激素:生长素,细胞分裂素和赤霉素 PH值:5.0-6.0 1、为什么诱导愈伤组织的过程中应避光培养? 强调几个概念: (1)愈伤组织: 离体的植物器官、组织或细胞,在培养一段时间以后,通过细胞分裂,形成一种高度液泡化、无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松无规则的组织。 (4)植物细胞的再分化: 知识拓展 当细胞分裂素和生长素共同使用时,能刺激愈伤组织的形成,而通过调节二者的浓度比,就可以调控植物细胞培养过程中芽和根的形成,称为“激素杠杆”。 具体内容详见P42拓展视野 反馈练习 1.下列属于组织培养的是: A.花粉培养成单倍体植株 B.芽发育成枝条 C.根尖分生区发育成成熟区 D.未受精的卵发育成雄蜂 2.在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中,下列哪一项条件是不需要的( ) A.消毒灭菌 B.适宜的温度 C.充足的光照 D.适宜的养料和激素 3.要将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整植株,不需要( ) A.具有完整细胞核的细胞 B.离体状态 C.导入外源基因 D.一定的营养物质和激素 1.你认为两个来自不同植物的体细胞完成融合,遇到的第一个障碍是什么? 2.有没有一种温和的去壁方法呢? 3.为什么两个原生质体能发生融合,这与细胞膜的什么特性有关? 4.如果两个来源不同的原生质体发生了融合,下一步该做何处理? 5.如何将杂种细胞培育成杂种植株? 比较 (1)在组织培养实验中,为什么要强调 所用器械的灭菌和实验人员的无菌操作? 植物组织培养中用到的培养基含有丰富的营养成分,有利于培养物的生长,然而各种杂菌同样也可以在上面迅速生长,所以植物组织培养过程中污染现象经常发生。防止杂菌污染,因为杂菌生长快,培养基一旦被污染,迅速生长的各种杂菌不但会和培养物争夺营养,而且这些杂菌生长的过程中会生成大量对培养物有害的物质,导致培养物迅速死亡。 造成培养基污染的因素有很多,一般包括:外植体带菌、培养瓶和各种器械灭菌不彻底、操作人员操作不规范等。所以在组织培养实验中用到的植物材料和各种器械都要进行彻底地灭菌,实验人员操作一定要规范,避免带入杂菌。 (2)在本实验中,切取胡萝卜块根时强调要切取 含有形成层部分,原因是这部分容易诱导形成愈伤组织。请思考一下,胡萝卜的其他部分(如茎、叶、花),是否也能培养成小植株,你能用实验的方法进行验证吗? 胡萝卜的其他部分(如茎、叶、花)也能培养再生形成小植株,只是诱导愈伤组织比较困难。 (3)请根据上面的实验过程,概括出植物组织培养技术的流程简图。 植物材料 (消毒) 脱分化 无菌接种、诱导 愈伤组织 再分化 诱导 试管苗 移栽到大田,培养成正常植株 (3)请根据上面的实验过程,概括出植物组织培养技术的流程简图。 一、植物组织培养 1、概念 离体的植物器官、组织或细胞 愈伤组织 根、芽 植物体 外植体 脱分化 植物激素: 细胞分裂素、生长素 再分化 3
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