LC中级培训课程.20080619修改.pdf

目 录 第1章 HPLC（硬件）使用的日常注意事项1 第2章 HPLC 系统介绍6 第3章 LC-20AD溶剂输送泵9 第4章 LC-20AT溶剂输送泵40 第5章 SPD-20A/SPD-20AV紫外-可见光检测器72 第6章 SIL-20A/SIL-20AC自动进样器104 第7章 Rheodyne 手动进样器 7725/7725i146 岛津液相色谱中级培训（硬件篇） 第1章 HPLC（硬件）使用的日常注意事项 1.1 选择和使用流动相的注意事项 岛津国际贸易(上海)有限公司 第 1 页 共 153 页 岛津液相色谱中级培训（硬件篇） 1.2 HPLC（硬件）使用的日常注意事项 1.2.1 启动前的检查 用HPLC进行分析时，即使装置无故障，有时也会无法得到良好的分析。分析前进行必 要的检查，可防患于未然。为此，下面就平时须留意的事项作一些介绍。 ·流动相必须经过过滤 为防止杂质（固体）进入到流路中，溶剂输送泵都装有吸滤器，但其微孔的孔径为10 微米，尺寸比此更小的颗粒物仍可通过吸滤器。这就会导致流路和色谱柱的堵塞和污染， 为此，建议用0.45微米的滤膜对流动相进行过滤。 ·流动相恢复到室温后再使用 当流动相温度与室温有差异时，就会出现基线不稳（尤其是基线漂移），并会有气泡 产生。 当水与有机溶剂相混合时，混合液的温度会与室温有较大的差异，这一点务必注意。 ·低压梯度系统四个流路都要充满流动相 如果低压比例切换阀及其连接到输液泵的管路中存在气泡，将影响梯度比例的精度和 稳定性，并造成保留时间的不稳定。 ·更换液体时的注意事项 1）更换具有互溶性的流动相时 ① 准备少量新鲜的流动相放在清洁的烧杯中备用 ② 从原先使用的流动相瓶中取出吸滤器，将其放入烧杯中并摇动使其得到彻底清洗 ③ 打开排液阀，按清洗键，使流动相冲洗泵的整个流路 ④ 将吸滤器插入新的流动相瓶中，减低流速然后关闭排液阀，将流路清洗一段时间 ⑤ 最后接上色谱柱和流通池，清洗一下整个流路 2）更换无互溶性的流动相时 在这种情况下，准备一种与新旧流动相都有互溶性的溶剂（如异丙醇）作为中间清 洗液，先换成中间清洗液，然后再换成新的流动相。每次的更换都应遵循前述的①～⑤步 的顺序进行操作。 3）更换缓冲液流动相时 新旧流动相的任一种或两者使用缓冲液时，应准备以水作为中间清洗液，首先用水 置换整个流路，然后换成新的流动相，以防止流动相中的盐产生析出。 在用蒸馏水或去离子水洗净之前，若用异丙醇等有机溶剂冲洗管路，可能会造成结 晶或残渣难于清除的后果，请务必注意。 第 2 页 共 153 页 岛津国际贸易(上海)有限公司 岛津液相色谱中级培训（硬件篇） ·如果进液管内不进液体，可用注射器吸液 发现进液管有大段气泡时，可以打开排液阀，用注射器从排液管中吸液。 ·通常在送液前进行冲洗（Purge）作业 有时在昼夜温差较大的情况下要停机或有几天未开机使用，泵头内会有气泡产生，如 不将气泡清除就有可能造成送液不畅，此时可进行数分钟的冲洗 （Purge）作业将气泡赶出。 ·检查柱塞密封垫的清洗装置 当使用缓冲液或磷酸溶液作流动相时，应进行密封垫的清洗。当然如果流动相为与水 不能互溶的溶剂，就不能用水来进行清洗，并应将清洗装置的瓶子放空。注意每隔2到3天 要更换清洗用的水，以防止细菌产生。 ·检查自动进样器的清洗液 自