发酵工程第22-23章.pptVIP

第22章 抗生素生产工艺 抗生素基本概念 抗生素是指能够在低浓度(nmol－mmol)下有选择地抑制或杀灭某些微生物或肿瘤细胞的一类低分子量(10000)的化学物质的总称。是由某些微生物、植物和动物产生的次级代谢产物。 抗生素基本概念 抗生素的工业化生产主要有： 微生物发酵法； 生物提取法； 化学合成法； 半合成法。 22.1 抗生素的分类 抗生素有4000多种，商品化100多种。抗生素可以从各种不同角度对抗生素进行分类。不同领域的科学家按不同习惯进行分类：生物学家按来源、药理学家按作用机理、化学家按结构、医学家按用途、生化学家按生物合成途径进行分类。 根据抗生素的生物来源分类 根据抗生素的作用分类 根据抗生素的化学结构分类 根据抗生素的Berdy系统分类 根据抗生素的合成途径分类 根据抗生素的作用机理分类 22.2 抗生素的生产工艺 发酵法生产抗生素的主要工艺步骤： 菌种的制备， 种子扩大培养， 发酵， 发酵液的预处理， 代谢产物的分离纯化， 干燥， 包装。 22.3青霉素的生产工艺22.3.1 菌种 青霉素生产菌株一般为产黄青霉，根据深层培养中菌丝体的形态分为球状菌和丝状菌。在发酵过程中，产黄青霉的生长发育可分成6个阶段。 ①分生孢子的I期； ②菌丝繁殖，原生质嗜碱性很强，有类脂肪小颗粒产生为II期； ③原生质嗜碱性仍很强，形成脂肪粒，积累贮藏物为III期； ④原生质嗜碱性很弱，脂肪粒减少，形成中、小空泡为IV期； ⑤脂肪粒消失，形成大空泡为V期； ⑥细胞内看不到颗粒，并有个别自溶细胞出现为VI期。 其中I～IV期称为菌丝生长期，菌丝很多，但青霉素较少，处于该时期的菌丝体适于用做发酵的种子。IV～V期是青霉素的分泌期，菌丝体生长减缓，并大量产生青霉素。VI期是菌丝体的自溶期。 22.3.2培养基 青霉素生产的培养基包括碳源、氮源、前体、无机盐等。 青霉菌可以利用多种碳源，如乳糖、蔗糖、葡萄糖等。氮源常选用玉米浆、精制棉子饼粉或麸皮粉，并补加无机氮源。前体可采用苯乙酸或苯乙酸胺，一次加量不大于0.1％，以防止前体对青霉菌的毒害。加入的无机盐包括硫、磷、钙、镁、钾等元素，由于铁离子有毒害作用，必须严格控制铁离子的浓度，一般控制在30μg/ml。 22.3.3 发酵条件控制 加糖速率根据发酵液中的残糖量、pH、排气中的CO2和O2含量来控制，残糖降至0.6％左右、pH上升时开始加糖。 氮源主要补加硫酸铵、氨水或尿素，发酵液中氨氮控制在0.05％。 前体是在发酵的适当时间添加，使苯乙酸胺等前体的浓度保持在一定范围内。 22.3.3 发酵条件控制 pH控制在6.4～6.6之间，可以通过添加葡萄糖、加酸或加碱来调节。 温度一般在发酵前期控制在25～26℃，后期控制在23℃。 通气比控制在1:0.8，搅拌转速根据发酵不同阶段的需要进行调整，使溶解氧不低于饱和溶解氧浓度的30％。 通常采用豆油、玉米油或化学合成消沫剂进行消沫，控制用量和加入方式。 22.3.4 产品分离和纯化 青霉素发酵液可以通过各种过滤器如板框过滤器、转鼓式真空过滤器过滤； 滤液用醋酸丁酯进行溶剂萃取2～3次；醋酸丁酯萃取液按150～200 g／10亿单位的量加入活性炭脱色，过滤除去活性炭；滤波采用蒸馏或直接结晶法结晶，晶体经过洗涤、烘干后，得到青霉素结晶产品。 第23章  氨基酸生产工艺 氨基酸生产概况 氨基酸是人体及动物的重要营养物质，还具有重要的生理功能，在食品、饲料、医药、化工等工业和农业上也有广泛的用途。 氨基酸的制造最早（1820年）是用蛋白质酸水解开始，1850年化学合成氨基酸研究成功，1956年开始发酵生产谷氨酸，现在发酵法或酶法生产的氨基酸已有20多种，已经成为氨基酸生产的主要方法。 在各种氨基酸的生产中，以谷氨酸的发酵规模最大，产量最大，赖氨酸次之。 23.1 氨基酸发酵工艺控制23.1.1 菌种 菌种种类 氨基酸发酵使用的菌种主要有谷氨酸棒状杆菌、黄色短杆菌、乳糖发酵短杆菌、短芽抱杆菌、黏质塞来氏菌。 菌种来源 野生型菌株，如谷氨酸、丙氨酸、缬氨酸等的生产菌种； 营养缺陷型突变株，如赖氨酸、苏氨酸、苯丙氨酸等生产菌种； 氨基酸结构类似物抗性突变菌种，如赖氨酸、精氨酸、脯氨酸等生产菌种； 营养缺陷型兼氨基酸结构类似物抗性突变菌种，如高丝氨酸、酪氨酸、亮氨酸等生产菌种。 23.1.2 培养基 发酵培养基的成分与配比是氨基酸产生菌生长代谢的主要因素, 与氨基酸的产氧转化率以及提取率的关系也很密切。所以，培养基配比是否合适，对氨基酸的生产至关重要。 氨基酸发酵的碳源可采用淀粉水解糖、糖蜜、醋酸、乙醇和烷烃等，普遍采用的是淀粉