SOD活性测定POD活性测定CAT活性测定质膜透性测定MDA含量测定色素含量测定实验方案及数据记录表格.docVIP

SOD活性测定POD活性测定CAT活性测定质膜透性测定MDA含量测定色素含量测定实验方案 一、细胞质膜透性的测定（电导法） 材料、仪器设备 1.材料：叶片1cm2的小叶片。 2.仪器：电导仪；电子天平；冰箱；真空泵；真空干燥器；恒温培养箱；电炉；50ml烧杯；50ml量筒；小镊子；纱布；表皿；滤纸条；镜头纸；剪刀；玻棒；胶头滴管；瓷盘。 实验步骤 1.清洗用具 所用玻璃用具均需先用清洗，然后用自来水洗3次蒸馏水洗3次，干燥后备用。 2.实验材料的准备及处理 选取叶龄相似的植物叶片，剪下后用湿布包住。实验用自来水冲洗叶片，除去表面沾污物，再用蒸馏水冲洗2次，用净轻轻吸干叶片表面水分，然后剪成约1cm2的小叶片（或用直径为1的打孔器钻取小片），注意除掉大叶脉。将剪下的小叶片混合均匀，快速称取鲜样份，每份g，分别放入编号为、放入真空干燥器，用真空泵抽气min（以抽出细胞间隙中的空气），然后缓缓放入空气，从真空干燥器中取出称重，盖上表皿，置于电炉上煮沸15min，冷却后再称重并加蒸馏水至原重量，继续 （注：自然浸泡需要4～～ 3.测定电导值 在测定前先将各杯浸泡液摇匀，测出各杯样本浸出液电导率值，记录到原始数据表上相应栏中。 （注：每测定完一个样液后，用蒸馏水漂洗电极，再用滤纸将电极擦干，然后进行下一个样液的测定） 电导率测定记录表 备注：时间：______年___月___日________________ 实验地点：_____________________________ 实验者：__________________ 记录者：___________________ 核对者：________________ 样本编号 处理 电导率(μS · cm－1) 对外渗率（％） C管（蒸馏水） (第X组第n个重复) a管（常温） （煮沸） a管（常温） （煮沸） a管（常温） （煮沸） 、结果计算 按下公式计算低温及常温处理电解质的相对外渗率： 电解质的相对外渗率（％）＝ × 100 二、叶绿素含量的测定（丙酮提取法） 材料、仪器设备 1.材料：叶片。 2.仪器：(感量0．01g)、研钵、棕色容量瓶、小漏斗、定量滤纸、吸水纸、擦境纸、滴管； 95％乙醇(或80％丙酮) 、石英砂、碳酸钙粉。 实验步骤 1. 实验材料的准备及处理 取新鲜叶片，去除中脉剪碎。称取剪碎的新鲜样品g，放入研钵中，加少量石英砂和碳酸钙粉及mL95％乙醇研成均浆，再加乙醇mL，继续研磨至组织变白静置3～5min。取滤纸1张置于漏斗中，用乙醇湿润，沿玻棒把提取液倒入漏斗，滤液流至mL 已编号的棕色容量瓶中；用少量乙醇冲洗研钵、研棒及残渣数次，最后连同残渣一起倒入漏斗中。用滴管吸取乙醇，将滤纸上的叶绿体色素全部洗入容量瓶中直至滤纸和残渣中无绿色为止。最后用乙醇定容至mL，摇匀。 以95％乙醇为空白对照叶绿体色素提取液在波长665nm、645nm 和652nm 下测定吸光度。 备注：时间：______年___月___日________________ 实验地点：_____________________________ 实验者：__________________ 记录者：___________________ 核对者：________________ Cary: Wave Length（nm）：645nm 、652nm、665nm Ave Time（sec）：0.1 Replicates：3 样本总数：______ Save As:E\XXX\ ____ 光波长（nm） 样本编号 665 652 645 备注 ___—___ (第X组第n个重复) ___—___ ___—___ 3、结果计算 按照经验公式，分别计算植物材料中叶绿素a、b 和总叶绿素的含量 ＝× 叶绿素b ＝× 总叶绿素a ＝× 或 总叶绿素a ＝× 为（ml,ml，加入的体积)； W为样品鲜重（g）。 超氧化物歧化酶（SOD）活性氮蓝四唑光化还原法 材料、仪器设备 1.材料：叶片。 2.仪器： 实验步骤 1. （1）0.05mol/L磷酸缓冲液(PBS，pH7.8)： A母液：0.2mol/L磷酸氢二钠溶液: 取Na2HP4·12H2O（分子量358.14）71.7g； B母液：0.2mol/L磷酸二氢钠溶液：取NaH2PO4·2H2O（分子量156.01）31.2g。 分别用蒸馏水定容到1000ml。 0.05mol/L PBS（pH7.8）的配制：分别取A母液(Na2HPO4) 228.75ml，B母液(NaH2PO4) 21.25ml，用蒸馏水定容至1000ml。 （2