吉林大学微生物学大实验终稿.pptVIP

微生物学实验 指导教师：任晓冬 单亚明 实验流程 相关理论知识（1） 微生物的分离与纯化 从混杂的微生物群体中获得只含某一种或某一株微生物的过程。 常用的分离、纯化方法 稀释涂布平板法、平板划线法、单细胞挑取法。 相关理论知识（2） 土壤生境 土壤是微生物生活的大本营，所含微生物无论数量还是种类都极其丰富,因此,土壤是微生物多样性生长的重要场所，是发掘微生物资源的重要基地，可以从中分离、纯化得到许多有价值的菌株。本实验将采用不同的培养基从土壤中分离不同类型的微生物。 目的要求 1、了解微生物分离和纯化的原理 。 2、掌握常用的分离纯化微生物的方法。 3、掌握倒平板的方法。 4、进一步熟练和掌握微生物的无菌操技术。 5、掌握微生物的培养方法。 实验原理 微生物分离与纯化 从混杂微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程。 平板分离法 普遍用于微生物的分离与纯化。其基本原理是选择适合于微生物生长的培养条件（如营养成分、酸碱度、温度和氧等,或加入某种抑制剂），在平板上培养微生物，当平板上长出单菌落后，挑取，得到纯种的微生物  试剂与器材 1、材料 含乳酸乳球菌、枯草芽孢杆菌、黑曲霉、根霉、青霉和放线菌的土壤样品，牛肉膏蛋白胨培养基（斜面、液体、半固体）、马丁氏培养基、查氏培养基等 2、试剂 10%酚、4%水琼脂 3、器材 盛9mL无菌水的试管、盛90mL无菌水并带有玻璃珠的三角瓶、涂布器、无菌吸管、接种环，酒精灯、无菌培养皿、显微镜、细胞计数板等。 牛肉膏蛋白胨培养基 牛肉膏 3g 蛋白胨 10g NaCl 5g 琼脂 15-20g 用水定容至 1000ml pH 7.0-7.2 用于分离细菌 查氏培养基 NaNO3 2g K2HPO4 1g KCl 0.5g MgSO4 0.5g FeSO4 0.01g 蔗糖 30g 琼脂 15-20g 用水定容至 1000ml 用于分离霉菌 高氏一号培养基 可溶淀粉 20g KNO3 1g NaCl 0.5g K2HPO4 0.5g MgSO4 0.5g FeSO4 0.01g 琼脂 15-20g 用水定容至 1000ml pH 7.2-7.4 用于分离放线菌 马丁氏培养基 葡萄糖 10g 蛋白胨 5g K2HPO4 1g MgSO4 0.5g FeSO4 0.01g pH 自然 用水定容至 800ml 用于分离酵母菌 实验步骤 倒平板 菌悬液的配制 菌液的稀释 接 种 培 养 微生物的纯种培养 注意事项 1、接种环要灼烧灭菌。接触菌体前要冷却。 接种后要在火焰上灼烧。 2、实验在洁净工作台内进行，操作时菌体不 应和火焰太过接近。 3、本实验要严格地按照无菌操作进行。 4、培养时要倒置培养，防止染菌。 5、取单菌落时不要碰到其它的菌落。 细菌的形态结构观察 相关理论知识 细菌形态 群体的形态 细菌菌落大多表面光滑湿润，有光泽，一般菌落较小，质地颜色均匀，同培养基结合不紧密。菌落特征与组成菌落的细胞结构、生长状况、排列方式、好气性和运动性直接相关。 个体的形态 主要分为球菌、杆菌、螺旋菌三大类，近年还发现星状和四方形细菌等。细菌形态随培养时间、培养基成分、浓度、培养温度、培养时间等发生变化。 细菌个体微小，较透明，必须染色方可呈现。根据细菌个体形态观察的不同要求，可将染色分为简单染色、鉴别染色、特殊染色三种类型。 目的要求 1、显微镜下观察细菌个体的形态。 2、学习环境中微生物的检查方法，并加深对微生物 分布广泛性的认识。 3、了解简单染色法的原理，并掌握其操作方法 4、学习并掌握微生物涂片、染色的基本技术和