Centaur XP 化学发光法检测原理.ppt

系统原理 液相：吖啶酯（AE） 速度快, 产光强: 液相：吖啶酯（AE） AE分子量小(MW 481)， 提升扩散速率 最大程度避免结合位点的遮蔽 提高分析灵敏度 液相：吖啶酯（AE）  AE直接发光, 无需催化剂 对外界环境变化(温度、PH等)不敏感，精密度↑ 发光在暗盒中进行, 本底低,背景干扰小。 微磁颗粒分离 固相: 氧化铁（Fe2O3） 特点: 磁性微粒极小 扩散速度快 捕获效率↑ 灵敏度↑ 结合模式 竞争法 夹心法 抗体捕获法 抗原抗体结合 抗体： 结合抗原 特异性 与AE发生共价结合 化学发光免疫用于标记 化学反应以发光形式释放能量 微磁颗粒 氧化铁颗粒被吸引至磁场区 与抗原或抗体发生共价结合 微磁颗粒 用于分离结合与未结合的反应物 夹心法 – 步骤 1 抗体捕获模式 用于分析物为抗体的测定方法中 分析物是样品中含有的抗体 抗体捕获模式 采用一种直接针对样品中抗体的特异性抗体 抗体捕获模式 结合有抗人类IgM特异性抗体的微磁颗粒（PMP）被加入到样品中 人类IgM抗体与PMP上结合的抗人类IgM抗体进行结合 抗体捕获模式 样品中的抗体通过磁场作用与可能造成干扰的其它物质进行分离 抗体捕获模式 加入对样品中抗体具有亲和力的AE-标记抗原 抗体捕获模式 未结合的AE标记抗原从结合物中被分离出来 抗体捕获模式 在这个抗体捕获模式的例子中，样品浓度和光释放强度之间有直接的关系 The small size of acridinium ester means an increased diffusion rate, minimized stearic hindrance (blockage of binding sites) which results in increased assay sensitivity. Another advantage of acridiunium ester is the intense, rapid flash. Most of the reaction is completed within one second. This results in a faster turnaround time. 样品针 样品针拾起一个吸头 样品针吸取样品仓内的样品 第1步 样品针将样品注入温育环中的比色管内 第2步 第3步 试验序列的最初几个步骤 检测过程 步骤 2 加样 试剂针吸取/分配试剂 步骤 3 比色杯根据项目测试协议进行孵育 步骤 4 比色杯在清洗站清洗  步骤 5 清洗站 吸取针 酸性试剂针 分析——清洗站 加酸 步骤 6 比色杯运行到光度计处 步骤 7 喷射棒 废液针 光电倍增管 (PMT) 碱性试剂针位于其中 PMT以相对光单位(RLUs)进行测量 工作区将数据换算成结果 光度计 光度计 固体废物抽屉 碱试剂加入化学发光产生 步骤 8 比色杯液体被吸走然后掉入废物箱 步骤 9 Ask the class “what is an immunoassay.” Emphasize the antibody-antigen binding reaction in the response. Another characteristic of antibodies is that we can covalently bind an organic molecule such as AE to the antibody without effecting it’s ability to bind to an antigen. We use paramagnetic particles to separate materials that we do not want to measure. Paramgnetic particles are iron oxide crystals that are attracted to a magnetic field. They may be coated with antibody or antigen. The particles are attracted to a magnetic field. Anything bound to the particles will stay with the particles. Anything not bound to the particles can be removed. Acridinium Ester labeled Antibodies that are specific to t