WNT促进右心室发育.pptxVIP

在第二生心区中经典WNT信号途径具有促进右心室的发育的功能;第二生心区（SHF），心脏祖细胞最初在这之外产生，然后迁移进入SHF并产生心内膜，心肌和平滑肌。以往用小鼠胚胎分析表明：心脏的发育是从两个心脏祖细胞群开始的由于第二生心区的距离迁移史，SHF很可能受到第一生心区（FHF）中不同的信号的调控。 第一生心区（FHF）的心脏细胞特异的对左心室心肌的发育起作用。 而第二生心区（SHF）对促进流出道（OFT），右心室（RV），心肌，心内膜，和大血管的平滑肌都有贡献。 ;FHF的标志性基因为：Hand1和Tbx5。 SHF的标志性基因为：Fgf10和Isl1. 小鼠遗传实验发现，Isl1在SHF有重要功能。 在胚胎干细胞进行实验细胞的发现，ISL1阳性细胞系可促进细胞向心内膜垫细胞，平滑肌细胞和心肌细胞分化 其他实验揭示了MEF2C转录因子是ISL1的直接靶因子。 作者因此构建了一个能在SHF特异激活Cre的Mef2c AHF cre品系，来阻断经典WNT信号途径。 ;经典Wnt/ β- 连环蛋白信号通路 (canonical Wnt/ β-catenin pathway ? Wnt配体 ↓ Frizzled, LRP ↓ Dsh/Dvl ↓ 多蛋白复合体 ↓ β- 连环蛋白;;以前的研究结果表明，从神经脊细胞出来的Wnt信号可抑制FHF的分化 作者研究结果表明，β – catenin具有影响右心室的扩增和室间隔发育，以及OFT形成的功能 作者还构建了一个增益表达β- catenin的功能实验模型,在SHF连续表达Wnt信号;方法;Mef2ccre 诱导的 β -catenin 在SHF缺失. 免疫荧光染色，9.5 D小鼠胚胎。 A-B：正常对照 C-D：Mef2ccre诱导β catenin 突变胚胎显示，β-catenin在咽心肌间质和流出道心肌层都降低表达，但心内膜中还是正常表达。 A，心房; BA，鳃弓，EC，心内膜，PE，咽内胚层。;Mef2ccre 诱导的 β -catenin 在SHF缺失后表型. 10.5–12.5 dpc β -catenin 无功能的敲除心脏表型， A-A’：表明右心室严重发育不全。 B- B’, C-C’, D -D’.为12.5d横截面，表明严重心脏异常。 E –E’:OFT变短。 PT，肺动脉干，LV，左心室，RV，右心室，RA，右心房，LA，左心房，ES，食道，TR，气管，Br，支气管。;Mef2ccre 诱导的 β -catenin 缺失后在心脏神经嵴（CNC）和SHF中的标记追示， A-A’, B-B’,C-C’用原为杂交法在9.5d，分别检测了A: ISL1 B: Sox10 C: Ap2. D-D’为Mef2c在11.5d通过Rosa26Report(R26R)显色出。 E-E’为横截图，F-F’为纵截图。 LV，左心室，RV，右心室，RA，右心房，LA，左心房，AO，主动脉，PT，肺动脉干，BA，鳃弓。;Mef2ccre 诱导的 β -catenin 缺失后在流出道OFT中的标记追示。 A–D：原位杂交 周期蛋白Cyclin D2。 E - F： Tgfβ2 G-H: Smarcd3 其中：黄色表示咽间质，黑色箭头表示流出道。 I- J：PH3为磷酸化组蛋白H3可以用来检测心肌细胞有丝分裂的水平。;Mef2ccre; β-cateninEx3flox缺陷小鼠（可以增益表达β- catenin）形态观察。9.5d。 A-B:形态学观察 C-D:横截面 E-F:纵截面 NT，神经管;BA，鳃弓，LV，左心室; pH，咽 表明流出道变短但细胞的密度和个数都增多了。;Mef2ccre ； β-cateninEx3flox和Mef2ccre; β-catenin品系小鼠功能的标记追示，OFT和咽间质中。 其中：黄色表示咽间质，黑色箭头表示流出道。 9.5d。 A–C：Nkx2.5 D-F:Bmp4 G-I:Fgf10 J-L:MLC2a-心房组织肌球蛋白轻链;小结：;结论