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*处理材料过量或者裂解不完全-建议:使用适量的起始材料,充分
研磨或者匀浆
DNA 产量低
*结合条件不恰当-建议:步骤5 精确估计上清量,加入 1.5 倍体积
AP3/E 量要准确
RNA 残留 *植物RNA 含量太丰富-建议:提高RNase A 处理浓度
*漂洗液 WB 中忘记加无水乙醇-建议:第一次实验时,在漂洗液
未提取到DNA
WB 中加入指定量无水乙醇。
离心柱堵塞 *研磨裂解不充分,团块多;裂解物太粘稠;离心力太小-建议:参 新型广谱植物基因组DNA快速提取试剂盒
见步骤 2 ,加一个离心步骤去除;减低起始材料量,不要处理过
量,加大离心力
洗脱下来的
DNA 溶液带颜色 *漂洗次数不够-建议:步骤8 完成后,加500μl 乙醇再漂洗一遍
或者膜上有明显 *起始材料太多过量-建议:减少起始处理材料,不要过量
的色素残留
*离心柱残留有较多乙醇或者底部不慎沾有乙醇-建议:确保做了步
骤9,否则残留乙醇会影响洗脱效率。
洗脱下来的
*使用了水或者其它非最佳液体代替洗脱缓冲液-建议:仔细阅读步
DNA 产量低
骤10 和注意事项5 和只使用洗脱缓冲液EB 洗脱。
*洗脱缓冲液量偏低-建议:使用200μl 洗脱缓冲液洗脱
A260 吸光值 *一些玻璃纤维素膜成分一起洗脱下来,干扰了吸光值-建议:将洗
异常偏高 脱的基因组DNA 溶液13,000rpm再离心一分钟,小心取上清使用。
*一些玻璃纤维素膜成分一起洗脱下来,抑制了酶切反应-建议:将
DNA 下游酶切 洗脱的基因组DNA 溶液13,000rpm 再离心一分钟,小心取上清使 目录号 HF213
不能切开或者 用。
使用手册
酶切不完全 *离心柱残留有较多乙醇或者底部不慎沾有乙醇抑制了酶切反应-建
议:确保做了步骤9,然后空气中晾几分钟,让残留乙醇挥发。 实验室使用, 仅用于体外
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