浅议牛耳枫中芦丁的含量测定.docVIP

浅议牛耳枫中芦丁的含量测定 ??? 【摘要】? 目的 建立牛耳枫的质量鉴测指标。方法 采用薄层色谱鉴别,高效液相色谱法测定牛耳枫中芦丁的含量,高效液相色谱条件 Hypersil柱(4.6 mm×250 mm,10 μl),流动相:甲醇-0.4%磷酸溶液(35∶65)。结果 高效液相法测定牛耳枫中芦丁,方法重现性好,准确可靠。结论 该方法可用于牛耳枫中芦丁的含量测定。 ??? 【关键词】? 牛耳枫;芦丁;高效液相色谱;薄层色谱 ??? 1? 仪器与试药??? 1.1? 仪器? 高效液相色谱仪:HP1100DAD检测器,十万分之一电子天平。??? 1.2? 试药? 芦丁对照品:中国药品生物制品检定所,批号080-9303,牛耳枫:购于广州市药材公司,甲醇(色谱纯):天津四友,硅胶G:青岛海洋化工厂。2? 方法与结果??? 2.1? 色谱条件? 色谱柱:依利特Hypersil C18(4.6×250 mm,10 μl),流动相为甲醇-0.4%磷酸(35∶65),流速为1 ml/min,检测波长为360 nm。??? 2.2? 对照品溶液的制备? 精密称芦丁对照品适量,置容量瓶中,加甲醇制成每1 ml含25 μg的溶液,即得。供试品溶液的制备:取牛耳枫药材粉末0.5 g,精密称定,加入乙醚50 ml,超声15 min,滤过,去弃乙醚液,药渣待挥干乙醚,药渣精密加甲醇50 ml,称定重量,水浴回流1 h,补足减失的甲醇重量,滤过,去弃初滤液,续滤液作供试品。测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液10 μl,注入色谱仪,测定,即得。??? 2.3? 分离度试验? 吸取芦丁对照品溶液、供试品溶液按上述方法测定,见图1、2。结果:样品中芦丁的分离度良好。??? 2.4? 标准曲线? 取芦丁对照品溶液(0.016704 mg/ml),分别进样5 μl、10 μl、15 μl、20 μl,按试验方法项下的色谱条件测定其峰面积。以芦丁进样量(μg)为纵坐标,色谱峰的面积为横坐标,绘制标准曲线,结果表明,芦丁在0.0835~0.3341 μg的范围内,其进样量与色谱峰面积呈良好的线性关系。回归方程:Y=0.0007X+0.0029,相关系数r=0.9997。??? 2.5? 稳定性试验? 取样品按含量测定项下的色谱条件测定其峰面积,每隔2 h测1次,连续测4次,结果:样品在8 h内测定是稳定的,RSD=0.82%。??? 2.6? 精密度试验? 取对照品溶液(0.016704 mg/ml),分别等量10 μl进样5次,按上述实验方法项下的色谱条件测定,RSD=0.6%。??? 2.7? 重现性试验? 取样品一式5份,按含量试验项下的条件测定,计算芦丁积分面积,结果:RSD=2.1%。??? 2.8? 回收率试验? 取已测定含量(0.736 mg/g)的供试品约0.25 g,精密称定,再精密加入0.1739 mg芦丁对照品,按上述供试品溶液的制备方法制备和测定,一式5份,其结果见表1。表1? 回收率试验结果表明:本测定方法的平均回收率为98%,基本符合要求。3? 4批样品的含量? 取样品分别按含量测定项下的方法分别测定,其结果见表2。表2? 4批样品含量??? 4? 讨论??? 牛耳枫中芦丁含量测定的流动相,还考察了流动相甲醇-水(35∶65)[2]、流动相甲醇-水-乙腈-冰乙酸(30∶57.5∶10∶2.5)[3]。采用流动相甲醇-水(35∶65),芦丁峰有少许拖尾。采用流动相甲醇-水-乙腈-冰乙酸(30∶57.5∶10∶2.5),芦丁峰分离效果较好,但要采用4种溶剂,成本也较高,而采用甲醇-0.4%磷酸溶液(35∶65),芦丁峰分离效果也好,且成本低、简便。??? 【参考文献】??? 1 黄泰康.常用中药成份与药理手册.北京:中国医药科技出版社,1994,1700.??? 2 全国中草药汇编编写组.全国中草药汇编(上册).北京:人民卫生出版社,1988,897-898.??? 3 邓富良,陈本美.高效液相色谱法测定槐米中的芦丁含量.湖南医科大学学报,2006,25(6):597-598