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atoh8异构体促进乳腺癌的转移及ifit1对lpsgaln诱导的致死性肝炎的保护作用研究word格式论文
南开大学学位论文使用授权书本人完全了解《南开大学关于研究生学位论文收藏和利用管理办法》关于南开大学(简称“学校”)研究生学位论文收藏和利用的管理规定,同意向南开大学提交本人的学位论文电子版及相应的纸质本,并委托印刷存档论文。本人了解南开大学拥有在《中华人民共和国著作权法》规定范围内的学位论文使用权,同意在以下几方面向学校授权。即:1.学校将学位论文编入《南开大学博硕士学位论文全文数据库》,并作为资料在学校图书馆等场所提供阅览,在校园网上提供论文目录检索、文摘以及论文全文浏览、下载等信息服务;2.学校可以采用影印、缩印或其他复制手段保存学位论文;学校根据规定向教育部指定的收藏和存档单位提交学位论文;3.非公开学位论文在解密后的使用权同公开论文。4.同意学校将本人向有关电子出版单位授权的学位论文(含电子版和授权书)转交相关授权单位。本人承诺:本人的学位论文是在南开大学学习期间创作完成的作品,并已通过论文答辩;提交的学位论文电子版与纸质本论文的内容一致,如因不同造成不良后果由本人自负。本人签署本授权书一份,交图书馆留存。学位论文作者暨授权人(亲笔)签字:常安涛2015 年5 月23 日南开大学研究生学位论文作者信息论文题目ATOH8异构体促进乳腺癌的转移及Ifit1对LPS/GalN诱导的致死性肝炎的保护作用研究姓名常安涛学号1120120395答辩日期2015年5月 23日论文类别博士√学历硕士 □专业学位硕士□同等学力硕士□划√选择学院(单位)医学院学科/专业(专业学位)名称肿瘤学联系电子邮箱changantao@通信地址(邮编):南开大学医学院317室非公开论文编号备注注:本授权书适用我校授予的所有博士、硕士的学位论文。由作者填写一份并签字后交校图书馆,如已批准为非公开学位论文,须附批准通过的《南开大学研究生申请非公开学位论文审批表》和“非公开学位论文标注说明”页。中文摘要第一部分乳腺癌是女性中最常见的肿瘤,其发病率居于所有女性肿瘤的首位。肿瘤转移是乳腺癌病人死亡的首要原因,占所有死亡病例的90%左右,是目前肿瘤研究和临床治疗的难点和热点。乳腺癌的远端转移是一个复杂而有序的过程,主要包括局部浸润(Local invasion),穿过血管或淋巴管壁(Intravasation),随循环系统到达远端部位,穿出血管或淋巴管(Extravasation)以及定植生长形成继发灶等几个过程。bHLH转录因子构成了真核生物蛋白质中的一个大的家族,称为bHLH 超家族,该家族的成员在机体的发育过程中具有重要的作用。很多bHLH转录因子在肿瘤的发生和进展,尤其是在肿瘤转移的过程中发挥着非常重要的作用。ATOH8是bHLH转录因子家族的一个成员,在胚胎发育期间广泛表达于多种器官或组织,并参与这些组织中相应细胞的分化过程。研究表明,ATOH8可以促进内皮细胞的分化,诱导新生血管的形成,同时对内皮细胞的运动能力也有一定的调节作用。此外,ATOH8可以调节Oct4和Nanog的表达,影响细胞的干性。鉴于ATOH8的这些生物学活性与肿瘤的发生发展,尤其是转移关系密切,我们猜测ATOH8 在肿瘤转移过程中具有重要作用,可以促进乳腺癌的转移。首先,为了探索ATOH8与肿瘤之间的关系,我们用qPCR和WesternBlot 的方法检测了乳腺癌细胞系中ATOH8的表达,发现ATOH8的表达水平与肿瘤细胞的恶性程度呈正相关。随后,我们用Lentivirus 系统在乳腺癌细胞系中稳定过表达ATOH8,结果发现ATOH8过表达后明显抑制乳腺癌细胞的迁移和侵袭能力,这和我们的研究假设恰好相反。并且我们还发现外源表达的ATOH8 蛋白比内源表达的小,因此我们推测肿瘤细胞中可能存在ATOH8 的异构体,而这些异构体可以促进乳腺癌细胞的转移。为了验证我们的假设,我们对ATOH8 的基因结构进行了分析,发现ATOH8 确实可能通过不同的剪切方式产生不同的异构体,其中有2个异构体(ATOH8-V1 和ATOH8-V2)的编码序列比ATOH8 标准序列大,因此我们将这两个异构体选定为我们的研究目标。随后,我们通过测序证实ATOH8-V1和ATOH8-V2在乳I腺癌细胞中广泛存在并有很强的表达。进一步,我们根据ATOH8-V1和ATOH8-V2的特异性序列,制备了特异性抗体,然后检测了这两个异构体在乳腺癌细胞系中的表达情况。结果发现,ATOH8-V1和ATOH8-V2在肿瘤细胞中高表达,且与细胞恶性程度呈正相关,转移能力强的细胞,其表达水平明显要高。随后,我们在乳腺癌细胞中稳定过表达这两个异构体,发现其可以显著增加细胞的迁移和侵袭能力,而用shRNA 沉默其表达后则会抑制细胞的迁移和侵袭。紧接着,我们又用小鼠移植瘤模型体内验证了这两个异构体的促转移作用,发现
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