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- 2018-05-17 发布于河北
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湖北省鄂州市2018年高考生物总复习 5.1 DNA的粗提取与鉴定 5.2多聚酶链式反应扩增DNA片段 5.3 血红蛋白的提取和分离学案 选修1
5.1 DNA的粗提取与鉴定
一、基础知识
(一)提取DNA的方法
提取生物大分子的基本思路是选用一定的 或 和 性质方面的差异,提取 ,去除其他成分。
(1)DNA的溶解性:
DNA和蛋白质等其他成分在 中溶解度不同,利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使 充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离目的。
此外,DNA不溶于 溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理,可以将DNA与蛋白质进一步的分离。
(2)DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性:蛋白酶能水解蛋白质,但是对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受 oC的高温,而DNA在 ℃以上才会变性。洗涤剂能够瓦解 ,但对DNA 影响。
(二)DNA的鉴定:在 条件下,DNA遇 会被染成蓝色,因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
二、实验设计
(一)实验材料的选取
凡是含有 的生物材料都可以考虑,但是使用 的生物组织,成功的可能性更大。
(二)破碎细胞,获取含DNA的滤液:动物细胞的破碎比较容易,鸡血细胞较好:鸡血细胞 ;鸡血细胞
以鸡血细胞为例,在鸡血细胞液中加入一定量的 ,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可。如果实验材料是植物细胞,需要先用
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