中药生物工程.ppt

中药生物工程 文献检索思路及实施步骤 * * 文献检索标题： 一、搞清基本概念 生物工程基本概念：一般认为是以生物学(特别是其中的微生物学、遗传学、生物化学和细胞学)的理论和技术为基础，结合化工、机械、电子计算机等现代工程技术，充分运用分子生物学的最新成就，自觉地操纵遗传物质，定向地改造生物或其功能，短期内创造出具有一定远缘性状的新物种，再通过合适的生物反应器对这类“工程菌”或“工程细胞株”进行大规模的培养，以生产大量有用代谢产物或发挥它们独特生理功能一门新兴技术。 生物工程 遗传工程 (基因工程) 细胞工程 微生物工程 (发酵工程) 酶工程 (生化工程) 生物反应器工程 “遗传工程”有广义和狭义之分。广义的“遗传工程”包括细胞水平上的遗传操作（细胞工程）和分子水平上的遗传操作（基因工程）；狭义的“遗传工程”就是基因工程（genetic engineering） 基因工程即一种遗传学技术，借助生物化学的手段，将一种生物细胞中的遗传物质取出来,在体外进行切割和重新组合，然后引入另一种生物的活细胞内，以改变另一种生物的遗传性状或创造新的生物品种。 细胞工程(Cell engineering)： 是指应用现代细胞生物学、发育生物学、遗传学和分子生物学的理论与方法，按照人们的需要和设计，在细胞水平上的遗传操作，重组细胞的结构和内含物，以改变生物的结构和功能，即通过细胞融合、核质移植、染色体或基因移植以及组织和细胞培养等方法，快速繁殖和培养出人们所需要的新物种的生物工程技术。 微生物工程即是发酵工程： 指采用工程技术手段，利用生物（主要是微生物）和有活性的离体酶的某些功能，为人类生产有用的生物产品，或直接用微生物参与控制某些工业生产过程的一种技术。 酶工程（生化工程）： 就是将酶或者微生物细胞，动植物细胞，细胞器等在一定的生物反应装置中，利用酶所具有的生物催化功能,借助工程手段将相应的原料转化成有用物质并应用于社会生活的一门科学技术。 生物反应器工程（bioreactor engineering） 是生物反应过程的一个部分，主要围绕生物反应器进行研究，研究生物反应过程中有关反应器设计放大等具有共性的工程技术问题，以达到在工业规模的反应器中给生物反应提供一个最佳的反应环境。 二、了解各领域历史沿革 1、基因工程：1980年Hobom B.采用合成生物学（synthetic biology）的概念；2000年Kool E.重新定义合成生物学为基于系统生物学的遗传工程，由于人工DNA的合成、全基因乃至基因组的合成，21世纪遗传工程已经进入了人工设计与合成生物系统的基因结构、基因调控网络、乃至基因组的时代 。经典范例是人工合成、制备胰岛素。 2、细胞工程：从1960年，科学家首次利用微繁殖技术将兰花的愈伤组织培养成植株后，植物细胞工程技术使现代花卉生产发生了革命性的变化，现今已发展为快速繁殖、培育无病毒植物，通过大规模的植物细胞培养来生产药物、食品添加剂、香料、色素和杀虫剂等的主要应用技术。 3、发酵工程：20世纪20年代的酒精、甘油和丙酮等发酵工业，属于厌氧发酵； 20世纪40年代初，随着青霉素的发现，抗生素发酵工业逐渐兴起；1957年，日本用微生物生产谷氨酸成功，如今20种氨基酸都可以用发酵法生产；20世纪70年代以后，基因工程、细胞工程等生物工程技术的开发，使发酵工程进入了定向育种的阶段。 20世纪80年代以来，随着学科之间的渗透和交叉，自动记录和自动控制发酵过程的全部参数已经被应用于生产。 4、酶工程：1926年美国的生化学家萨姆纳(J. B. Summer)证实了从刀豆中获得的结晶JR酶是一种蛋白质，其后又分别与人合作在1930年和1937年获得了胃蛋白酶和过氧化氢酶等晶体，说明酶是一类蛋白质，因而在1946年和他的同事共获诺贝尔化学奖;伴随着基因工程而逐渐兴起，多采用定点突变技术对天然酶蛋白进行改造；近几年国际上提出蛋白质全新设计（protenindenovodesign）的概念，即寻找组建蛋白质结构的方法，以获得自然界原先不存在的，具有全新结构和功能的酶蛋白。 5、生物反应器工程：现已运用于工业生产中。 三、熟悉各工程现采用的制药核心技术流程： 1、基因工程：获得目的基因→重组质粒→构建基因工程菌→工程菌的大规模培养→分离提取目的产物 2、细胞工程： 悬浮细胞培养 收集细胞 提取纯化产物 3、发酵工程： 上游工程 良种株的选育 最适发酵条件 确定 营养物的准备 中游工程 细胞大量培养 次生产物生产代谢 下游工程 分离发酵液 纯化产品 4、酶工程：在生物体内找到目标酶 →基因扩增与增强表达 →导入基因工程菌或基因工程细胞 →表达 5、生物反应器工程： 我国生物工程专业排名前10