实验2 植物组织水势测定(小液流法).pptVIP

植物生物学实验 实验二 植物组织水势的测定（小液流法） 1. 了解测定植物组织水势的方法及其优缺点 2. 学习用小液流法测定植物组织水势的方法 目的要求: 植物组织水势的测定 水势表示水分的化学势，象电流由高电位处流向低电位处一样，水从水势高处流向低处。 植物体细胞之间，组织之间以及植物和环境之间的水分移动方向都由水势差决定。 植物组织水势的测定 液相平衡法：小液流法、称重法、质壁分离法 压力平衡法：压力室法气相平衡法：露点法 植物组织水势和渗透势的测定方法： 水势测定 冰点降低法 渗透势 蒸气压渗透压计法 植物组织水势的测定 一、液体交换法测定植物组织水势 小液流法 小液流法测定植物组织水势的原理？ 问题： 植物组织水势的测定 （一）原理 1、当植物组织与外液接触时发生水分交换： ★ 植物组织的水势低于外液的渗透势（溶质势），组织吸水，外液浓度变大；ψ植物ψS ★ 植物组织的水势高于外液的渗透势（溶质势），组织失水，外液浓度变小；ψ植物 ψS ★ 若两者相等，则水分交换保持动态平衡，外液浓度保持不变； ψ植物＝ψS 植物组织水势的测定 2、同一种物质浓度不同时其比重不一样，浓度大的比重大，把高浓度的溶液一小液滴放到低浓度溶液中时，液滴下沉；反之则上升。 3、根据外液浓度的变化情况即可确定与植物组织相同水势的溶液浓度。根据以下公式计算出溶液的渗透势，即为植物组织的水势。 植物组织水势的测定 【实验原理】 植物材料浸入 不同浓度溶液中 植物材料水势 低于溶液水势 植物材料水势 等于溶液水势 植物材料水势 高于溶液水势 材料吸水 外界溶液浓度变大 比重变大 外界溶液浓度不变 比重不变 材料失水 外界溶液浓度变小 比重变小 植物组织水势的测定 浸过材料的溶液 滴回 同一浓度而未浸过材料的溶液中 比重小的液流上浮 比重不变的液流静止 比重大的液流下沉 此溶液的水势即等于所测材料的水势 溶液渗透势的计算： ψS=﹣iCRT 式中 ψS—溶液的渗透势，以MPa为单位； R＝0.008314MPa·L·mol﹣1·K﹣1 T—绝对温度，即273+t℃； C—溶液的摩尔浓度，以mol·kg－1 为单位 i－溶液的等渗系数，蔗糖=1。 植物组织水势的测定 （二）实验材料 植物组织水势的测定 【用具】 试管架；试管;打孔器;毛细管；镊子;青霉素瓶 【试剂】 蔗糖溶液 甲烯蓝粉末 植物组织水势的测定 （三）操作步骤 1. 配制不同浓度的蔗糖溶液 2.用打孔器在绣球花的不同部位打100-200片，混匀，每个青霉素瓶各放入15-20片，（打孔要迅速，避开叶脉，选边缘整齐无破损的叶片） 3.从配制好的试管中各取2ml（量准确？）到相应的青霉素瓶或称量瓶中（用一只移液管由低 高，不要润洗）。放置20—30min，期间摇动数次，以加速水分平衡。 植物组织水势的测定 试管 1 2 3 4 5 6 7 8 1mol·L-1 蔗糖溶液（ml） 20 40 60 80 100 120 140 160 蒸馏水（ml） 180 160 140 120 100 80 60 40 浓度 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 4. 染色：用接种针沾入微量甲烯蓝粉末加入青霉素瓶中，摇匀，溶液变蓝。（干燥针头先用蒸馏水湿润，加入的甲烯蓝量一定少，使各瓶中颜色基本一致） 5.观察液滴升降： 用毛细吸管取青霉素瓶有色液 插入相应试管中部 缓慢从毛细吸管尖端横向放出一滴蓝色溶液，轻轻取出滴管，观察蓝色液滴的移动方向并记录。（用白纸划一直线置于试管背面，方便观察） 植物组织水势的测定 毛细管放置稳定 挤出小液滴 取出毛细管 观察液滴升降 静止不动 液滴 植物材料 溶液浓度变大 溶液浓度变小 溶液浓度不变 ψw ψS ψw ψS ψw =ψS 6.分别测定不同浓度中有色液滴的升降，找出与组织水分势相当的浓度，根据原理公式计算出组织的水势。 植物组织水势的测定 试管号 1 2 3 4 5 6 7 8 溶液浓度 （mol/l 液滴移动的方向 植物组织细胞 Ψw与ψπ的比较 溶液浓度 0.05 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 液滴移动方向 具有平衡浓度结果 植物组织水势的测定 溶液浓度 0.05 0.1 0.2 0.3 0