基于氨基酸聚氨酯刺激响应性纳米载体用于抗癌药物控制释放-amino acid-based polyurethane stimulate responsive nanocarrier for controlled release of anticancer drug.docx

优秀毕业论文 精品参考文献资料 基于氨基酸的聚氨酯刺激响应纳米载体用于抗癌药物的 控制释放 中文摘要 近些年来，聚合物纳米粒子被认为是一项很有前景的科技用于抗癌药物的靶向传 递与控制释放。这些纳米粒子具备在体内循环中稳定，而在肿瘤组织或细胞中可快速 释放药物的特质。聚氨酯是一种重要的多功能材料，在生物医用领域有广泛的应用。 因其优异的物理性能和生物相容性，传统的聚氨酯作为生物稳定性材料，被广泛应用 于制造心脏瓣膜、导尿管、人造血管，假肢等植入性设备。生物可降解聚氨酯由于其 优良的可降解性，近年来被应用于药物释放和组织工程等领域。目前报道的用于药物 传递方面的生物可降解聚氨酯材料，大多是含有酯键，碳酸酯键等可降解基团，在生 理环境下它们的降解速度比较慢。为了进一步加快药物在肿瘤组织或者细胞内的释放， 研究者在聚氨酯的合成中引入了含有酸不稳定的基团或是还原敏感可断裂的双硫键。 目前用于合成还原响应性聚氨酯的含双硫键单体主要是采用 2,2-硫代二乙醇，这将可 能导致一定的细胞毒性。因此，本论文目的是制备具有生物相容性和生物可降解性的 聚氨酯纳米载体，其在细胞外环境中稳定，而在细胞质中可快速释放药物。本论文设 计合成了基于氨基酸的二醇单体，制备了基于氨基酸的还原可降解聚氨酯，制备了刺 激响应的胶束，并用于小分子抗癌药物(DOX)的细胞内高效快速释放。进一步表面修 饰靶向配体 c(RGDfK)，有效地提高了肿瘤细胞的摄取，并增强了药效。而修饰有组 胺(Histamine)的载药胶束则表现出了明显的内涵体逃逸以及快速的药物释放性能。 论文第一章主要对刺激响应性纳米载体，聚氨酯和基于聚氨酯的纳米药物载体作 了简要概述。 论文第二章设计合成了新型的基于 α-氨基酸还原可降解的聚氨酯，并将其用于制 备抗癌药物的控制释放载体。首先通过 3,3-硫代二丙酸(DTDPA)与丝氨酸乙酯盐酸盐 (SER)的酰胺化反应制备了基于丝氨酸的含有双硫键的二醇单体—二硫二丝氨酸乙酯 酰胺(SS-BSER)。然后利用赖氨酸乙酯二异氰酸酯(LDI)与 SS-BSER 的聚加成反应制 备基于 α-氨基酸的还原可降解聚氨酯 (AAPU(SS))。接着通过 AAPU(SS)二醇和 PEG-NCO 的 氨 酯 反 应 制 备 三 嵌 段 聚 合 物 ， 聚 乙 二 醇 -b- 聚 氨 酯 -b- 聚 乙 二 醇 I PAGE PAGE 2 III III 中文摘要 基于氨基酸的聚氨酯刺激响应纳米载体用于抗癌药物的控制释放 (PEG-AAPU(SS)-PEG)用于药物传递系统。结果表明，该三嵌段聚合物可以在水中自 组装形成尺寸大约为 155 nm 的胶束型纳米粒子(PEG-AAPU(SS)-PEG 胶束)，并且可 以包载疏水抗癌药物阿霉素(DOX)。细胞毒性试验表明，在胶束浓度在 0.1 到 1.0 mg/mL 时，RAW 264.7 和 MCF-7/ADR 细胞存活率均大于 90 %。体外释放实验表明 载药胶束在含有 10 mM 谷胱甘肽(GSH)的 PB（10 mM, pH 7.4）中 12 h 释放了 84 % 的阿霉素(DOX)，而在不含 GSH 的介质中 12 h 仅释放了 29 %。激光共聚焦照片显示 载药胶束可以将 DOX 高效地运送到细胞内，并在细胞内快速释放出 DOX。MTT 结 果表明，载 DOX 胶束对 RAW 264.7 和 MCF-7/ADR 细胞均有明显的细胞毒性。特别 是对耐药 MCF-7/ADR 细胞，体外毒性测试结果表明载药胶束的毒性比自由 DOX 高， 当 DOX 的浓度为 40 μg/mL 时，经载药胶束和自由 DOX 孵育 48 h 的细胞存活率分别 为 22.3 %和 57.9 %。这种新型基于 α-氨基酸的还原可降解的聚氨酯为可控药物传递 系统的设计与合成提供了新的思路。 论文第三章在第二章合成的 PEG-AAPU(SS)-PEG 载体表面修饰了 c(RGDfK)多肽， 制 备 了 人 脑 胶 质 瘤 细 胞 靶 向 的 载 药 胶 束 。 该 胶 束 由 c(RGDfK)-PEG-AAPU(SS)-PEG-c(RGDfK)和 PEG-AAPU(SS)-PEG 两种聚合物组成。 通过调节两种聚合物的比例，可制备得到表面 c(RGDfK)含量不同的胶束。载 DOX 胶束的 MTT 数据表明，含有 30 wt.%靶向分子的载药胶束的半致死浓度（IC50）为 4.8 μg/mL，是无靶向载药胶束的 1/3，且较接近于自由 DOX（IC50 = 3.3 μg/mL）。流式细 胞结果和激光共聚焦照片均显示，靶向 30T-AAPU(SS)胶束与非靶向胶束相比，能快 速进入 U87 MG 细胞并释放 DOX，显示出更强的荧光。靶向内吞抑制