正确留取微生物学标本[1].ppt

刘瑜 临床微生物学标本的留取 泰安市中心医院血液内科 韩天洁 临床标本的分类 标本采集的基本原则 1)采集标本应注意无菌操作,避免细菌污染. 2)根据患者病期不同,采集不同部位标本. 3)采集标本应在使用抗菌素之前,否则应在分离培养时加入药物拮抗剂;在采集时不可用消毒剂,必要时可用生理盐水冲洗,擦干后取材. 4)尽可能采集病变明显部位的材料. 5)标本必须新鲜,采集后及早送检. 6)送检过程种多数菌需冷藏送运,少数不耐寒细菌需保温,粪便标本常置于甘油缓冲盐水保存液中. 第一节 血培养 判断和分析 判读方法 1、加速度法 2、速率法 3、阈值法：临界值判断功能提供卓越的处理延迟进入培养瓶能力 BacT/ALERT 培养基 FAN 需氧/厌氧中和抗生素瓶（FA需氧，FN厌氧） 中和抗生素能力（活化碳粉） 培养基营养成份更丰富 最多可容纳10ml血液/体液标本 3180例阳性标本BacT/Aler 报告时间 10h 20.8% 10-24h 49% 24-48h 28.2% 48h 2.0% 血培养送检的指征 1． 发热（≥38℃）或低温（≤36℃）。2． 寒战。3． 白细胞增多（10×10??9/L，特别有“核左移”未成熟的或带状的白细胞增多。4． 粒细胞减少（成熟的多核白细胞1×10??9/L）。5． 血小板减少。6． 皮肤粘膜出血。7． 昏迷。8． 多器官衰竭。 皮肤消毒严格按以下步骤进行： 1． 首先用70%酒精擦拭静脉穿刺部位待30秒钟以上。2． 然后用一根碘酊或碘伏棉签消毒皮肤（1%-2%碘酊30秒或10%碘伏消毒60秒），从穿刺点向外以1.5cm~2cm直径画圈进行消毒。3． 最后用70%酒精脱碘。严格执行三步消毒后，可行静脉穿刺采血。注意对碘过敏的患者，只能用70%酒精消毒，消毒60秒钟，待穿刺部位酒精挥发干燥后穿刺采血。 培养瓶消毒程序 1． 用70%酒精消毒血培养瓶橡皮塞子。2． 酒精作用待60秒。3． 在血液注入血培养瓶之前，用无菌纱布清除橡皮塞子表面剩余的酒精，然后注入血液。 采血部位:多次采血应在不同部位的血管穿刺以排除皮肤菌丛污染的可能。要避免从血管插管内取血,因插管常被污染其培养结果不能反映真实情况。在不同部位取血, 2 次分离出同样菌种才是确定病原菌的有力证据。选择肘静脉等饱满、血流量大的血管，避免一次采血量不足二次再抽而增加污染机会，严格无菌操作，采血部位严格消毒。 疑似细菌性心内膜炎，采肘动脉、股动脉，不在静滴抗生素静脉处抽血。 另外磺胺类药物和抗生素可影响细菌检出的结果，因此采集标本应力争在抗菌药物治疗之前，否则应提醒细菌室，选用可以中和抗生素的培养基，这样血液中残留的抗生素被中和掉，有利于细菌生长，以便准确地检测出种类。 无菌操作：无论采取何种方法，在血液培养的全过程，从皮肤消毒、标本采取、运行、分离移种等，皆应十分注意无菌操作。用头皮针为新生儿和婴幼儿取血时，应换针头再将血注入培养瓶中。 采集的血量和次数 1． 怀疑急性原发性菌血症、真菌菌血症、脑膜炎、骨髓炎、关节炎或肺炎的患者：应立即采集2或3份血培养瓶，快速进行血培养。2． 不明病源的发热，如隐性脓肿，伤寒热和波浪热：发热开始采集2或3份血培养。24h至36h后，估计温度升高之前（通常在下午）立即采集2份以上血培养。 3． 怀疑菌血症或真菌菌血症，血培养结果持续阴性，应改变血培养方法，以便获得罕见的或苛养的微生物。4． 感染性心内膜炎，对急性心内膜炎患者1h（2h内）采集3份血培养，如果所有结果24h后阴性，再采集3份血培养瓶。入院前两周内接受抗生素治疗的患者，连续三天采集血培养，每天2份。 血培养瓶的运输 采血后血培养瓶或采集管应立即送到临床微生物实验室。 血培养瓶和采集管短期内置于室温不影响细菌检出，不要冷藏，如果血培养瓶在送往实验室培养或自动化仪器检测之前不得已需放置一段时间，应置于35℃~37℃孵箱中。 尿液标本的留取 正常人尿液是无菌的，而尿液细菌培养最大的问题是杂菌污染。正常人外尿道有大肠杆菌、葡萄球菌等存在。而这些细菌又是尿路感染中常见的病源菌。因此要作好尿液细菌学检查，首先应注意标本收集问题。 尿液标本的留取 尿液经尿道排出时会受到尿道内正常菌群的污染,但定量培养时计数不会超过103 CFU /m l, 泌尿系感染时定量培养在104 ～105 CFU /m l 。 另外,由于绝大多数的泌