红掌快速繁育最适培养条件筛选研究.docVIP

红掌快速繁育最适培养条件的筛选研究 　　摘要从愈伤组织、不定芽、生根等培养指标筛选红掌快速繁育的最适培养条件，结果表明：外植体最佳消毒时间是70%酒精浸泡60 s，红掌愈伤组织诱导的最佳基本培养基为MS培养基，适宜的激素组合及浓度配比为6-BA 1.0 mg/L+2，4-D 0.4 mg/L，添加5 g/L琼脂，光照强度1 000 ~1 500 lx，13 h/d的光照时间，NAA添加量为1.0 mg/L。筛选到的最佳培养条件适宜红掌的快速繁育需求。 　　关键词红掌；快速繁育；培养条件；筛选 　　中图分类号 S682.3；Q943.1 文献标识码A文章编号 1007-5739（2011）11-0212-02 　　 　　红掌为天南星科花烛属多年生附生常绿草本花卉，又称花烛、安祖花、蜡烛花、灯台花等。其株高1 m，不开花时是非常好的观叶植物。红掌成年植物1年每株可以开5~8 枝花，花大、花形奇特、颜色鲜艳。花的色彩变化也多，叶片优美，既能观花又可赏叶。近年来，红掌在园林中的应用是越来越广泛[1-3]。当前应用比较多的红掌品种有广红、Alexis、Evita等10余个品种。由于红掌品种多样且观叶观花俱佳，加上其象征着热情向上，深受人们的喜爱，为花中珍品，成为仅次于热带兰的第二大热带花卉[4-5]。目前，红掌常规的繁殖方法为分株繁殖，但难以扩大生产，红掌快速繁殖的最理想途径是组织培养[6]。本文探讨了红掌的快速繁殖条件，优化了各繁育元素的组合，以更好地开发利用红掌资源。 　　1材料与方法 　　1.1试验材料 　　试验所用的材料购自西南大学苗木繁育中心的广红红掌品种，由实验室自行进行繁育并培植保存。 　　1.2试验方法 　　1.2.1表面消毒时间对叶片成活率的影响。在组培的过程中，由于培养基中的营养物质丰富且培养条件适宜，微生物繁殖的速度远快于外植体的繁殖速度，其可与外植体进行养分的争夺，阻碍外植体的生长，因此在进行组培之前，应对外植体进行消毒灭菌。选取新引进的广红品种长出的新叶作为研究对象。首先对叶片进行消毒处理：新叶先用自来水冲洗30 min，然后在超净工作台上用70%酒精分别设置浸泡处理30、60、90 s，分别用无菌水冲洗处理后的叶片3次，置于消毒瓶中备用。接种时将叶片切为带主叶脉、大小为1.5 cm×1.0 cm的长方块，???培养瓶中严格无菌操作。研究表面消毒时间对叶片成活率的影响。 　　1.2.2培养基对不定芽诱导的影响。基本培养基是植物组织培养中的重要基质，不同的植物及不同的外植体对培养基的要求也不同。因此，在植物的组织培养过程中，选择合适的培养基至关重要。选择MS和1/2 MS、1/4 MS为基本培养基，这3种培养基的区别为：1/2 MS培养基中大量元素含量是MS培养基的1/2，1/4 MS培养基中大量元素含量是MS培养基的1/4，其他成分一致。研究不同的培养基对红掌不定芽诱导的影响。 　　1.2.3不同取材部位对愈伤组织诱导的影响。以红掌广红品种的叶柄、叶片、茎段作为外植体，研究不同部位对愈伤组织诱导的影响。将不同部位的外植体接入最佳培养基中，50 d后观察并记录诱导率。 　　1.2.4培养基中不同激素对愈伤组织诱导的影响。分别选取展开2周的广红红掌的最佳取材部位为外植体，接种于已筛选出的基本培养基表面。采用6-BA +2，4-D的培养基激素组合，设计不同水平浓度进行试验。观察培养基中激素对愈伤组织诱导的影响。设计水平为：6-BA 0.5 mg/L+2，4-D 0.2 mg/L、6-BA 1.0 mg/L+2，4-D 0.4 mg/L、6-BA 1.5 mg/L+2，4-D 0.8 mg/L、6-BA 2.0 mg/L+2，4-D 1.6 mg/L。 　　1.2.5不同琼脂浓度对红掌愈伤组织诱导的影响。以上述试验获得的最佳条件为基础，添加不同浓度的琼脂，以改变培养基的硬度，从而设计不同硬度的培养基对红掌愈伤组织进行诱导研究。琼脂添加用量分别为2、3、4、5、6 g/L。将供试红掌叶片切成1.5 cm×1.0 cm的长方块接种。60 d后统计在不同琼脂添加量处理的愈伤组织诱导率。 　　1.2.6光照强度对不定芽分化及增殖的影响。在已获得的最佳培养条件的基础上，分别在光照强度为500、1000、1 500、2 000、3 000 lx（光照时间均为13 h/d）和黑暗条件下进行培养，以研究不同的光照强度对红掌不定芽分化及增殖的影响。 　　1.2.7不同浓度生长素对生根的影响。以筛选的最佳培养基为基本培养基，选用生长素NAA，浓度分别设为0、0.1、0.3、0.5、1.0 mg/L，不添加任何细胞分裂素。30 d后统计不同条件下红掌的生根数及生长情况。 　　2结果与分析 　　2.1不同