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PPT流式细胞仪
流式细胞仪与流式细胞术
目录
概述
流式细胞仪:是测量染色细胞标记物荧光强度的细胞分析仪。可在单个细胞分析和分选基础上对细胞的物理或化学性质(如大小、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等)进行快速测量并可分类收集。
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概述
组成:
流动室和液流系统
激光源和光学系统
光电管和检测系统
计算机和分析系统
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流动室和液流系统
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激光源和光学系统
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光电管和检测系统
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流式细胞仪的工作原理
基本工作原理示意图
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流式细胞仪的工作原理
流式细胞仪的工作原理
散射光的测定:
前向散射光
侧向散射光
前向散射光
侧向散射光
散射光的测定
流式细胞仪的工作原理
前向散射光
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流式细胞仪的工作原理
侧向散射光
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流式细胞仪的工作原理
荧光测量
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流式细胞仪的工作原理
细胞分选
通过流式细胞仪进行细胞分选主要是在对具有某种特征的细胞需进一步培养和研究时进行的。
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压电晶体
产生机械振动
不充电
充电
流式细胞仪的工作原理
数据显示与分析
参数
FS:反映颗粒的大小
SS:反映颗粒的内部结构复杂程度
FL:反映颗粒被染上的荧光数量多少
数据显示方式与分析方法
数据显示与分析
单参数直方图:
由一维参数(散射光或荧光)与颗粒计数(COUNT)构成,反映同样散射光或荧光强度的颗粒数量的多少
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数据显示与分析
双参数直方图:
纵轴和横轴分别代表被测量细胞的两个测量参数,根据这两个参数就可以确定细胞在图上的表达位置。
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双参数直方图点图
二维等高图
数据显示与分析
设门分析技术:
Gate设置:指在某一张选定参数的直方图上,根据该图的细胞群分布选定其中想要分析的特定细胞群,并要求该样本所有其他参数组合的直方图只体现这群细胞的分布情况。根据门的形状又分为了线性门、矩形门、圆形门、多边形门、任意形状门和十字门。
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数据显示与分析
Gate设置
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A、B、C均为任意门
线性门
数据显示与分析
设门分析技术:
Region设置: 区阈(region, R)与门(gate, G ) 是两个相关的概念,区阈可与门对应,但是也可以包含于门。
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流式细胞术测细胞凋亡
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Fig.1
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Fig.2
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Fig.3
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