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几种消毒剂对蚋卵原代细胞培养效果的比较 【摘要】目的： 探索适宜于蚋卵(胚胎)原代细胞培养的消毒方法。方法： 70%乙醇、2.8%NaClO、15%甲酚皂、0.1%HgCl2及1%过氧乙酸5种消毒剂按不同消毒时间相互搭配，结合使用抗生素PBS液对蚋卵进行消毒处理。结果： 70%乙醇10 min、1%过氧乙酸15 min、2.8% NaClO 5 min 3种消毒剂的相互搭配，结合使用了抗生素PBS液，使得原代细胞培养污染得到有效控制，细胞生长和增殖状态较好。结论： 70%乙醇10 min、1%过氧乙酸15 min、2.8% NaClO 5 min联合使用是蚋卵原代细胞培养的一种安全有效的消毒方法。 【关键词】 蚋科; 消毒药(剂); 细胞培养; 消毒效果　Comparison of Sterilizing Effects of Several Disinfectants on Blackfly Eggs in Primary Cell Culture ZHOU Jing1, CHEN Hanbin2, YANG Ming2 (1. Department of Medical Biotechnology, Guiyang Medical College, Guiyang 550004, Guizhou, China; 2. Department of Biology, Guiyang Medical College, Guiyang 550004, Guizhou, China) [Abstract] Objective: To explore disinfecting methods for primary cell culture of blackfly eggs (embryos). Methods: Different combination of 70% ethanol, 2.8% NaClO, 15% cresol soap, 0.1%HgCl2 or 1% peroxyacetic acid respectively with antibiotics PBS, and combination of their different montages were tried to disinfect eggs (embryos) for different minutes, and the results were compared. Results: Combination of 70% ethanol treating for 10 min, 1% peroxyacetic acid for 15 min, and 2.8% NaClO for 5 min plus treatment of antibiotics PBS controlled contamination effectively and cells of the first generation grew well in vitro. Conclusions: The joint use of 70% ethanol for 10 min, 1% peroxyacetic acid for 15 min, and 2.8% NaClO for 5 min is a safe and effective scheme for blackfly eggs (embryos) disinfection in primary cell culture. [Key words] simuliidae; disinfectants; cell culture; disinfection effect 蚋类，俗称黑蝇(blackflies)，隶属于昆虫纲(Insecta)，双翅目(Diptera)，蚋科(Simuliidae)，是人类和禽畜多种疾病的传播媒介，其中包括人盘尾丝虫病(Onchocerciasis)、畜类盘尾丝虫病和由欧氏曼森线虫(Mansonella ozzardi Manson，1891)引起的曼森丝虫病及禽鸟住白细胞虫病(Leucocytozoonsis)等疾病，引起学者的广泛关注，并在基础分类、生态学、疾病关系和防制等领域的研究取得长足的进展[1]。本课题于2009年3月～2010年4月开展了蚋类原代细胞培养的探索研究。由于其组织细胞来源于野外采集蚋卵(胚胎)，存在生境污染的复杂性，如何选取适合的消毒剂及消毒时间配伍对蚋卵进行有效灭菌处理是蚋类原代细胞培养及细胞系建立的瓶颈问题。本实验选取几种不同消毒剂相互配伍，分别考察其对细胞培养的影响，以确定原代培养阶段适宜的消毒方法。 1 材料与方法 1.1 试剂和仪器 Schneider and Sa