围产期乙肝病毒感染对脐血免疫功能影响的研究.docVIP

围产期乙肝病毒感染对脐血免疫功能影响的研究 【关键词】 乙肝病毒;感染;脐血;T淋巴细胞亚群;围产期 乙肝病毒宫内感染是发展成为乙肝表面抗原慢性携带者的重要原因之一，也是导致出生后接种乙肝疫苗失败的主要原因[1]。我国是乙肝高发区，母婴传播是形成慢性乙肝病毒感染的重要原因，约占我国婴幼儿感染的1/3，人群中慢性乙肝病毒携带者40%～50%是母婴传播造成的。胎儿期乙肝病毒感染，不仅易形成以后慢性乙肝病毒携带状态，且是肝硬化和肝癌的高危因素[2]。我们通过观察母体乙肝病毒感染新生儿脐血T淋巴细胞亚群的变化，了解其免疫功能状态。 1　资料与方法 1.1　一般资料 2006至2010年在我院出生的足月顺产新生儿，出生体重2 500～4 000 g，出生1 minApgar评分ge;9分。对照组：孕母妊娠期及分娩过程中均无异常。乙肝病毒组：母体HbsAg阳性或HbsAg、HBeAg 双阳性但肝功能正常，孕妇单胎妊娠，孕期无先兆流产、先兆早产史，无感染史，无妊娠合并症及并发症，未使用药物及接触放射线，其丈夫排除乙肝病毒携带。 每组40例。 1.2　标本采集 选择符合条件的妊娠孕妇，于胎儿娩出、断脐后，从母体端抽取脐带血1 ml于EDTA-2K抗凝管，2 ml于肝素锂抗凝管，4℃保存待测。 1.3　方法 T细胞亚群检测：采用美国BD公司的FAcscalibur流式细胞仪及IMK专用试剂，将每管分别加入相应试剂20 mu;l，以及EDTA-2K抗凝管脐带血100 mu;l避光10 min，荧光染色;加入溶血剂2 ml,8～10 min后离心5 min(800～1 000 r/min)，弃去上清液;加入PBS 2 ml混匀，离心5 min(800～1 000 r/min)，弃去上清液;加PBS 0.8 ml，上机测定;Simul TEST数据分析。 1.4　统计学分析 应用SPSS 13.0统计软件，计量资料以x-±s表示，采用t检验， P0.05为差异有统计学意义。 2　结果 与对照组比较，乙肝病毒组脐带血中淋巴细胞CD+3、CD+8百分比无明显变化(P0.05);CD+4比例下降(P0.05)，CD+4/CD+8比值下降(P0.05)。见表1。　表1　脐带血中T淋巴细胞亚群的测定结果 3　讨论 T淋巴细胞亚群是机体免疫系统内功能最重要的一群细胞，CD+3是T淋巴细胞的重要表面标志，反映了体内T淋巴细胞的总数。CD+8T淋巴细胞主要功能是直接杀伤靶细胞，又称　细胞毒性T细胞(CTL)。CD+4T淋巴细胞功能为调节免疫反应，又称辅助性T细胞(TH)，按分泌的细胞因子不同可分为TH1和TH2，TH1细胞分泌的细胞因子促进CTL和自然杀伤(NK)细胞消灭靶细胞，发挥细胞免疫作用。TH2细胞分泌细胞因子辅助B细胞合成和转换免疫球蛋白，发挥抗体免疫作用。T细胞亚群中的CD+4细胞和CD+8细胞的相互制约及平衡对机体免疫应答具有重要的调节作用，这两个淋巴细胞亚群之间相互作用，维持着机体的正常免疫功能。若CD+4细胞功能低下，机体易发生感染，CD+8细胞功能亢进则发生免疫抑制，CD+4/CD+8T淋巴细胞的比例上升，提示正相免疫调节占优势，即CD+4T淋巴细胞介导的免疫应答占优势，反之提示负相免疫调节占优势。 研究发现，脐血中部分T淋巴细胞亚群细胞降低，幼稚T细胞活化后部分无反应，认为脐血淋巴细胞对外界抗原有一定的耐受性[3]。宫内感染新生儿T 淋巴细胞总数变化无差异性，但CD+4T淋巴细胞计数及百分数降低，CD+8T淋巴细胞计数及百分数升高，CD+4和CD+8细胞比值下降，提示宫内感染新生儿细胞免疫功能受到抑制，T细胞亚群之间的比例处于失衡状态，CD+4/CD+8比值降低，存在免疫调节功能低下，可能与HBV 特异性刺激致使机体处于耐受状态[4]。本研究中乙肝病毒组脐血CD+3T淋巴细胞百分比无明显变化，CD+4T淋巴细胞百分比降低，CD+8T淋巴细胞百分比无明显变化，CD+4/CD+8比值降低，结果与上述研究一致。CD+4T细胞减少和功能下降，导致机体免疫功能低下，尤其细胞免疫功能低下; CD+4/CD+8比值下降，存在免疫调节功能低下。提示母体感染乙肝病毒影响新生儿机体免疫功能的正常发挥，免疫细胞相互调控异常。 新生儿乙肝病毒宫内感染可导致乙肝疫苗接种失败，并最终发展为乙肝表面抗原慢性携带者，其中免疫功能异常是其重要影响因素之一。因此，对乙肝病毒感染孕妇所娩出的新生儿，应予以重视，采取积极有效的预防措施，以避免接种失败和慢性乙肝病毒携带状态的发生。 【参考文献】 1　West DJ，Margolis HS.Prevention of hepatitis B virus infection in the United States：a pediatr