化验基础知识讲座 培训资料.ppt

色谱柱：进行色谱分离用的细长管。 固定相：管内保持固定、起分离作用的填充物。 流动相：流经固定相的空隙或表面的冲洗剂。 几个概念 优点 １．高效能，是指一般色谱柱都有几千块理论板，毛细管柱可达１０５－１０６块理论班．因而可以分析沸点十分相近的组分，和极为复杂的多组份混合物．例如，用毛细管，可以分析轻油中１５０个组份． ２．高选择性．是指固定相对性质极为相似的组份，如同位素，烃类的异构体等有较强的分离能力．主要通过选用高选择性的固定液． ３．高灵敏度．指用高灵敏度的检测器可检测出１０－１１－－１０－１３克的物质．因此可用于痕量分析． ４．分析速度快．一般分析一次用几分钟到十几分钟．某些快速分析中，一秒钟可以分析若干份．色谱法易于自动化．操作与处理都自动化．速度很快． ５．应用范围广．气象色谱法可以分析气体和易挥发的或可以转化为易挥发的液体和固体．也可以分析无机物．高分子，和生物大分子，而且应用范围正在日益扩大！　　　 §2. 色谱法分类 气相色谱法 液相色谱法 一、按两相所处的状态分类 气固色谱法 液固色谱法 气液色谱法 液液色谱法 二、按固定相的几何形式分类 1.柱色谱法 2.纸色谱法 3.薄层色谱法 1.柱色谱法 (column chromatography) 柱色谱法是将固定相装在一金属或玻璃柱中或是将固定相附着在毛细管内壁上做成色谱柱，试样从柱头到柱尾沿一个方向移动而进行分离的色谱法。 2.纸色谱法（paper chromatography） 纸色谱法是利用滤纸作固定液的载体，把试样点在滤纸上，然后用溶剂展开，各组分在滤纸的不同位置以斑点形式显现，根据滤纸上斑点位置及大小进行定性和定量分析。 3.薄层色谱法 (thin-layer chromatography, TLC) 薄层色谱法是将适当粒度的吸附剂作为固定相涂布在平板上形成薄层，然后用与纸色谱法类似的方法操作以达到分离目的。 三、按分离原理分类 1.吸附色谱法 2.分配色谱法 3.离子交换色谱法 4.尺寸排阻色谱法 5.亲和色谱法 按色谱法分离所依据的物理或物理化学性质的不同，又可将其分为： 1.吸附色谱法 ( adsorption chromatography ) 利用吸附剂表面对不同组分物理吸附性能的差别而使之分离的色谱法称为吸附色谱法。 2.分配色谱法 ( partition chromatography ) 利用固定液对不同组分分配性能的差别而使之分离的色谱法称为分配色谱法。 §3 色谱分离过程和色谱图 一、色谱分离过程 该过程主要利用试样中各组分在固定相和流动相间具有不同的溶解和解析能力；或不同的吸附和脱附能力；或其它亲和性能的差异。 色谱过程与色谱图如图12-1，2 图12-1 色谱过程 图12-2 色谱图 A B KAKB 二、色谱图（chromatogram） 试样中各组分经色谱柱分离后，按先后次序经过检测器时，检测器就将流动相中各组分浓度变化转变为相应的电信号，由记录仪所记录下的信号——时间曲线或信号——流动相体积曲线，称为色谱流出曲线，或色谱图。 常用术语： 2. 色谱峰 当组分随流动相进入检测器时，其响应信号大小随时间变化所形成的峰形曲线。正常的色谱峰呈正态分布。 1. 基线 在操作条件下，仅有纯流动相进入检测器时的流出曲线。 3. 峰高与峰面积 峰高：色谱峰顶点与峰底之间的垂直距离称为峰高(peak height)。用h表示。 峰面积：峰与峰底之间的面积称为峰面积(peak area)，用A表示。 4. 区域宽度 三种表示方法： 1) 标准偏差 σ= 0.607h 处峰宽的一半 = FG/2 2) 半高峰宽 Wh/2=2.355σ 3) 峰宽 W = 4σ=1.70 Wh/2 5. 保留值 保留值：试样中各组分在色谱柱中停留时间值或将组分带出色谱柱所需流动相的体积值称为保留值。 1) 保留时间?：从进样至被测组分出现浓度最大值时所需时间tR。 2) 保留体积 ：从进样至被测组分出现最大浓度时流动相通过的体积，VR。 化验基础知识与仪器维护讲座 2008年3月 主讲：马雷 丰原宿州生物化工有限公司 一、化 验 基 础 知 识 （一）化