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- 2018-05-22 发布于河南
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微生物第四章_微生物的纯培养和显微技术2
可见光的波长在3900~7600?,光学玻璃透镜分辨本领的极限值可达0.2微米;而电子束的波长约为可见光的十万分之一 。 常见显微镜的分辨率: 光学显微镜 200nm 扫描电子显微镜 ~1nm 透射电子显微镜 ~0.1nm 3、相差显微镜 光线透过透明标本,波长(颜色)和振幅(亮度)没有多大变化,用普通显微镜观察透明标本,其形态和内部结构难以分辨。细胞各部分折射率和厚度不同,当光线通过时,直射光和衍射光光程有差别,而人眼看不到,但是可通过相差显微镜看到。 相差显微镜(phase contrast microscope )采用特殊光学装置:环状光阑和相差板,利用光的干涉,将光的相位差转变为人眼可见的振幅差(明暗),使能不染色而看到活细胞及细胞内的某些显微结构。 其发明人F.Zernike因此获1953年诺贝尔物理奖。 4、荧光显微镜 荧光显微技术原理:荧光素吸收uv放出波长较长的可见光,因此在uv照射下,发荧光的物体会在黑暗背景显现为光亮有色物体。在免疫学和分子生物学应用广泛。 现在可以用一种荧光染料来区分革兰氏阳性和阴性细菌。右图中所示为 荧光染色的铜绿假单胞杆菌(革兰氏染色阴性,绿色)和蜡样芽胞杆菌(革兰氏染色阳性,橙色)。 5、透射电子显微镜(简写TEM) 用波长短的电磁波取代可见光,使分辨率提高。 工作原理类似,因光源不同,有区
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