微生物学检验志贺菌属知识讲稿.ppt

抗原结构 O抗原：化学成分为脂多糖；耐热；与相应抗体结合出现颗粒状凝集；沙门菌分群依据。 H抗原：化学成分为蛋白质；不耐热；与相应抗体结合出现絮状凝集；沙门菌分型依据。 Vi抗原：位于菌体外层；抗原性强，相应抗体可作为筛选带菌者指标；不耐热；能阻止O抗原与相应抗体结合；伤寒沙门菌和丙型副伤寒沙门菌有Vi抗原，有V－W变异。 几种沙门菌的抗原组分 组（群） 型 O抗原 H抗原 第1相 第2相 A组 PA 1，2，12 a - B组 PB 1，4，5，12 b 1，2 S.typhimuriun 1，4，5，12 i 1，2 C组 PC 6，7，Vi c 1，5 S.cholerae 6，7， c 1，5 D组 S.typhi 9，12，Vi d - S.enteritidis 1，9，12 g.m - 变异性 S-R变异： H-O变异： V-W变异： 相位变异： 耐药性变异： 抵抗力 对理化因素抵抗力弱 尤其对酸敏感 对消毒剂敏感 易产生耐药性 临床意义 致病物质：菌毛、内毒素、Vi抗原 所致疾病： ◆肠热症 ◆食物中毒 ◆败血症 ◆慢性肠炎 免疫性：病后免疫力牢固，以细胞免疫为主 肠热症发病过程 伤寒杆菌和副伤寒杆菌 小肠黏膜 经口 肠壁淋巴组织 被吞噬细胞吞噬 进入血液 菌血症 骨髓 脾 肝 胆囊 肾 小肠 随尿液排出 随粪便 排出 再次侵入 肠壁，引 起并发症 潜伏在胆囊中 随粪便排出 带菌者 沙门菌感染的预防 加强饮食卫生，切断传播途径 发现并及时隔离病人 接种伤寒和副伤寒沙门菌疫苗进行特异性预防 课件制作 陆曙梅 肠道杆菌 志贺菌属 志贺菌属 是引起人类细菌性痢疾的病原菌 包括四群 ,共44个血清型 A群--痢疾志贺菌 B群--福氏志贺菌 C群--鲍氏志贺菌 D群--宋内志贺菌 形态染色 革兰阴性杆菌，无芽孢、无荚膜、无鞭毛，多数菌株有菌毛 志贺菌 培养特性 兼性厌氧、营养要求不高 在肠道选择培养基上呈无色半透明S型菌落菌落 SS平板－－无色菌落 　Mac平板－－无色菌落 　EMB平板－－无色菌落 宋内志贺菌多呈扁平、R型菌落，个别菌株可迟分解乳糖 志贺菌抗原分类 菌种 群 型 亚型 痢疾志贺菌 A 1～10 8a、8b、8c 福氏志贺菌 B 1～6x、y变种 1a、1b、2a、2b、3a、3b、3c、4a、4b 鲍氏志贺菌 C 1～18 宋内志贺菌 D 1 抵抗力 对理化因素抵抗力弱 尤其对酸敏感 对消毒剂敏感 易产生耐药性 变异性 S-R变异 耐药性变异 毒力变异 临床意义 致病物质： ◆菌毛 ◆内毒素 ◆志贺毒素：属外毒素，由A群志贺菌产生，具有肠毒、细胞毒、神经毒作用 所致疾病：经肠道传染，引起细菌性痢疾，有3种临床类型，即急性菌痢、慢性菌痢、中毒性菌痢 免疫性： ◆主要依赖局部SIgA， ◆病后免疫力不迟久 微生物学检验 标本采集 ◆粪便或肛拭 ◆新鲜脓血便 ◆立即送检或床边接种 ◆保存于30％甘油盐水或卡-布培养基 检验程序 粪便或肛拭 肠道选择平板 可疑菌落 KIA MIU、IMViC 报告结果 增菌 菌落涂片染色 多价血清玻片凝集 初步鉴定 最终鉴定 系统生化反应 因子血清凝集 检验方法 将待检标本接种肠道选择平板，35℃培养18～24小时。 若标本含菌量少，可先增菌（GN增菌液）4～6小时再分离培养。 挑取无色半透明菌落，进行初步生化反应鉴定。 符合志贺菌生化反应特征可进行血清学鉴定 血清学鉴定先用志贺氏多价诊断血清作玻片凝集试验，若凝集再用A、B、C、D群诊断血清鉴定到种、型。 血清学鉴定需注意K抗原的阻断作用，并应考虑是否为EIEC。 志贺菌鉴定 初步鉴定 ●挑取可疑菌落接种KIA、MIU培养基 ●若符合KIA：KA－－；MIU：－ ＋/－ －，再作志贺菌多价诊断血清玻片凝集试验 最后鉴定：全面生化反应和单价血清玻片凝集试验 若出现生化反应符合，血清学不凝集现象，应考虑K抗原的阻断作用，可将菌液加热100℃15～30min后，重复凝集试验，仍不凝集可考虑EIEC，需进行鉴别。 志贺菌鉴别 与EIEC的鉴别 与类志贺菌的鉴别 与动力不明显、不产H2S的沙门菌的鉴别 志贺菌血清学鉴定 先用志贺菌多价诊断血清鉴定群，再用A、B、C、D群单价血清鉴定血清型。 A群以1、2型为主，多有K抗原 C群型别多 D群只有1个血清型 B群型别多，抗原结构复杂，多无K抗原。 我国以B群为主 不典型菌株的鉴定 在鉴定中如遇生化反应符合，血清学不凝集；血清学凝集，生化反应不符合，可考虑不典型菌株。 将不典型菌株在肉汤中反复传代，促其恢复典型性状 志