无创DNA产前检测讲解课件.ppt

无创的理论基础来自于1997年香港大学卢教授在柳叶刀上发表的一篇文章，文章指出在母体的外周血中可以发现胎儿的游离DNA，这一发现使得无创技术从理论上成为可能。胎儿游离DNA可能来自于正常生理和免疫反应引起的细胞溶解，也可能是在胎儿的发育过程中某些组织细胞凋亡后，释放的DNA。 胎儿游离DNA的几大特点： 一、含量占全部游离DNA（母体+胎儿游离DNA）的3-6%，此含量可以满足测序检测；二、5周胎儿游离DNA就可以检测到，之后随孕周增加，有个体差异，所以有些孕妇会因胎儿游离DNA浓度不够重新抽血取样；三、平均长度为162个碱基，很短，容易降解，所以对样本的保存运输有高要求；四、代谢快，血液离开母体2小时就无法检出，同样对保存运输提出了高要求。 原理：假定100微升血浆中有50份母体，5份胎儿基因组，通过比较总体数量的差异来确定胎儿是否患病。 在胎儿正常的情况下，母体50份有100条21号染色体，胎儿5份有10条21染色体，总计110条；如果胎儿为21三体，母体50份有100条21号染色体，胎儿5份有15条21染色体，总计115条，通过比较110和115条的数量差异就可以判断胎儿21三体的情况。 从1997年确认孕妇外周血中存在游离胎儿DNA开始，无创产前检测技术就在迅速发展。对于该技术的临床转化，中国是走在世界前列的，早在2009年广东省就发布了通过高通量测序技术开展胎儿21三体检测的通知。随着技术逐步完善和临床数据的积累，国内国外专家对于该技术的认可度越来越高，到2014年美国正式授予Ariosa无创产前许可证，同年卫计委也启动了无创产前检测在全国的试点工作。 国内外的临床数据都已证明无创产前DNA检测的准确性，国外的三篇数据病例总数1000多，国内两篇10000多病例，结果显示，其灵敏度均大于99%。特异性都为100%。国内外大规模临床数据表明此技术准确性完全可以满足临床需求。 目前，该技术在美国，欧洲等国家和地区已经实现了大规模临床应用。 2012年12月，美国妇产科学会（ACOG）与美国母胎医学会（SMFM）共同发表了545号委员会意见：推荐无创DNA产前检测用于染色体非整倍体检测。 意见建议以下适应人群考虑接受无创产前DNA检测： 1. 母亲年龄超过35岁。 2. 超声结果显示胎儿非整倍体高危。 3. 生育过三体患儿。 4. 早孕期，中孕期或三联-四连筛查结果为非整倍阳性结果。 5. 父母为平衡罗伯逊易位，且胎儿为21，13三体高危。 在2013年该技术被认定为MIT十大技术突破 在卫生部产前诊断技术专家组成立10周年大会上,对无创技术做出了充分的认可。 首先，肯定的是其近似于产前诊断的高精度筛查，同时，其筛查范围大，取样便捷，能明显解决产前诊断技术力量不的问题。而且，技术有后续发展空间---未来可能能够通过无创方式，检测所有的染色体数目异常疾病或是无创单基因疾病等。 无创产前检测和传统唐筛、产前诊断相比较，具有准确性率高、假阳性率低的特点。只需10ml孕妇静脉血，无需空腹采血，无宫内感染和流产风险，孕12周即可检测，10工作日内出报告。 下面我们一起来看同样1万人，有无创技术支持和没有无创技术的情况比较 在无创技术筛选下，低风险9928人，继续妊娠，产下9928位正常胎儿，高风险72人，进一步接受产前诊断，确定是唐氏患儿；而在传统唐筛下，低风险8840人，其中漏诊14个唐氏患儿，高风险1160人，行产前诊断，检出58例唐氏患儿，而1102人属正常，这其中有2-3人由于检测造成流产。 现有无创产前DNA检测的定位在传统唐筛检测高风险后的分流，但随着技术临床应用越来越广泛，未来无创技术势必会替代传统唐筛，成为这三类三体疾病的一级筛查手段。 无创产前DNA检测经过以下流程，首先抽取5-10ml孕妇外周血，经过冷链运输将样品送到北京总部，随后进行血浆分离，文库构建，之后上机进行测序，再经过生物信息学分析后生成检测报告 这里是我们的送检单与知情同意书模板 这是我们的保险说明书 保险说明书详细注明了我们的保险范围，包括以下4个方面，5个项目。首先对于检测结果为假阴性的情况，即报告正常但分娩胎儿为21三体的，赔付40万；假阴性情况，胎儿未分娩的，赔付2万。下面两个项目和我公司的检测并不相关，但也包含在我们的保险范围内，孕妇在分娩期间身故的，赔付10万；胎儿出生半年到一年身故的，赔付5万。最后对于检测报告为高风险的，我们会报销其产前诊断费用，上限为2500。 这是我们的检测报告 这是一份报告模板，当风险指数大于参考值时即为高风险，小于参考值时为低风险，在结果中也有注明。下方有具体的风险曲线图，黑色箭头指示的是具体的风险曲线，当它高于红色箭头指示的高风险临界线时，即为高风险，在绿色箭头指示的安全线附近即为低风险。 最后，我们来看看