临床标本的病原生物检测3.pptxVIP

上次课程内容本次课程内容下次课程内容课程内容临床标本的病原生物检测-2总结与复习-2临床标本的病原生物检测-3总结与复习-3病原生物与免疫实验学考试（实验考试） 时间：下周上课时间 地点：病原中心sosoyjw课程内容本次课程进度安排时间：180min讲解示教：酶联免疫吸附试验（ELISA）（20min）操作：临床标本的病原生物检测-3（120min）斑点法ELISA试验第1桌：病案04检测：患者血清中恶性疟原虫相关抗原第2桌：病案03检测：患者血清中日本血吸虫相关抗原第3桌：病案02检测：患者血清中斯氏狸殖吸虫相关抗原第4桌：病案12检测：患者脑脊液中新生隐球菌相关抗原第5桌：病案10检测：患者脑脊液中脑膜炎奈瑟菌相关抗原第6桌：病案14检测：患者血清中戊型肝炎病毒相关抗原细菌的鉴定-3：上次课试验结果判定。总结与复习-3（40min）汇总复习试验水平考试相关事项的说明 课后：分离模拟试题与评估表，整理装订好实验报告册。完成实验报告，上交存档。匿名填写教学质量评估表（注明带习教师），直接交至主任办公室。sosoyjwELISA（酶联免疫吸附试验）ELISA: enzyme linked immunosorbent assay中文名称：酶联免疫吸附试验反应类型：酶免疫标记技术常用方法：直接法（ 检测抗原）间接法（ 检测抗体）双抗夹心法（ 检测抗原）竞争抑制法（ 检测抗原或抗体）sosoyjw抗原抗体反应类型1、沉淀反应： 可溶性抗原（如血清蛋白）+ 相应抗体 = 沉淀物2、凝集反应： 颗粒性抗原（如细菌）+ 相应抗体 = 凝集物3、细胞溶解反应： 抗原 + 相应抗体 = 抗原抗体复合物激活补体细胞溶解4、中和反应： 细菌外毒素或病毒 + 相应抗体 = 抗原抗体复合物5、免疫标记抗原抗体反应 1）酶标记技术 2）荧光标记技术、 3）放射性核素标记技术 4）胶体金标记技术sosoyjw硝酸纤维膜固相吸附物检测物标记物酶底物显色反应1、直接法酶标抗体抗原2、间接法酶标抗抗体抗体包被已知抗原3、双抗夹心法酶标抗体抗原包被已知抗体4、竞争抑制法显色抑制酶标抗原抗原包被已知抗体细菌的鉴定-3生长特性鉴定：动力试验结果判定（病案5、6、7、8、9）生化反应鉴定：尿素分解试验结果判定（病案5、7、8）枸橼酸盐利用试验结果判定（病案5、7、8）吲哚试验结果判定（病案5、7、8）血清反应鉴定：肥达试验结果判定（病案7）耐药性鉴定：药敏试验结果判定（病案5、6、7、8、9）sosoyjw进度安排斑点法ELISA（直接法）1、点膜；2、干燥； 3、封闭； 4、洗涤；5、加稀释酶标抗体，反应； 6、洗涤；7、加酶底物显色反应；8、终止反应，观察记录试验结果。阳性抗原 ＋阴性抗原 －待检抗原 ？sosoyjw进度安排斑点法ELISA（直接法）1、点膜；2、干燥； 3、封闭； 4、洗涤；5、加稀释酶标抗体，反应； 6、洗涤；7、加酶底物显色反应；8、终止反应，观察记录试验结果。阳性抗原 ＋阴性抗原 －待检抗原 ？sosoyjw进度安排斑点法ELISA（直接法）1、点膜；2、干燥； 3、封闭； 4、洗涤；5、加稀释酶标抗体，反应； 6、洗涤；7、加酶底物显色反应；8、终止反应，观察记录试验结果。阳性抗原 ＋阴性抗原 －待检抗原 ？sosoyjw进度安排斑点法ELISA（直接法）1、点膜；2、干燥； 3、封闭； 4、洗涤；5、加稀释酶标抗体，反应； 6、洗涤；7、加酶底物显色反应；8、终止反应，观察记录试验结果。阳性抗原 ＋阴性抗原 －待检抗原 ？sosoyjw进度安排斑点法ELISA（直接法）1、点膜；2、干燥； 3、封闭； 4、洗涤；5、加稀释酶标抗体，反应； 6、洗涤；7、加酶底物显色反应；8、终止反应，观察记录试验结果。阳性抗原 ＋阴性抗原 －待检抗原 ？sosoyjw进度安排斑点法ELISA（直接法）1、点膜；2、干燥； 3、封闭； 4、洗涤；5、加稀释酶标抗体，反应； 6、洗涤；7、加酶底物显色反应；8、终止反应，观察记录试验结果。阳性抗原 ＋阴性抗原 －待检抗原 ？sosoyjw进度安排斑点法ELISA（直接法）1、点膜；2、干燥； 3、封闭； 4、洗涤；5、加稀释酶标抗体，反应； 6、洗涤；7、加酶底物显色反应；8、终止反应，观察记录试验结果。阳性抗原 ＋阴性抗原 －待检抗原 ？sosoyjw进度安排斑点法ELISA（直接法）1、点膜；2、干燥； 3、封闭； 4、洗涤；5、加稀释酶标抗体，反应； 6、洗涤；7、加酶底物显色反应；8、终止反应，观察记录试验结果。阳性抗原 ＋阴性抗原 －待检抗原 ？sosoyjw进度安排斑点法ELISA（直接法）试验步骤时间安排1、点膜（固定