离子通道 知识介绍.pptVIP

植物细胞离子通道;植物细胞膜系统和离子通道; 植物根系不仅从土壤中吸收水分，还要吸收各种矿质元素，以维持正常的生命活动，促进植物的生长发育目的获得高产优质?如：小麦、水稻、玉米、烟草、蔬菜、水果等 植物吸收矿质元素首先细胞从环境中吸收，这个环境可以是植物的生存外部环境，如土壤，也以是植物本身的内部环境? 肥料→离子→吸附→交换→细胞 被动吸收：外液浓度＞细胞浓度 吸收 主动吸收：外液浓度＜细胞浓度 吸收 积累离子 被动吸收： ⒈扩散作用：指分子或离子沿着化学势梯度或电化学势梯度转移的现象? 楞思特方程式： ;⒉协助扩散：指小分子物资经膜转运蛋白顺浓度梯度或电化学势梯度的转运? 转运蛋白：膜上具有转运功能的蛋白质又称传递蛋白? 分为二类：载体蛋白 通道蛋白 ⑴载体蛋白：是一类内部蛋白，由载体蛋白转运的物质首先与载体蛋白的活性部位结合，结合后载体蛋白发生构象变化，被转运的物质释放到细胞内。 载体蛋白转运物质具有饱和现象。 ⑵通道蛋白：由细胞膜中一类内部蛋白构成的孔道，或有的称膜中由大分子组成的孔道 又叫离子通道。可被化学方式或电化学方式激活，控制离子顺势流过细胞膜，在形成维持跨膜离子梯度和信号传导等生理过程起重要作用。 检测：膜片钳技术 取几平方微米细胞膜或者全细胞膜，测定跨膜离子电流的大小，即在保持跨膜电压恒定的条件下，测定通过膜上离子通道的离子流大小。 其原理，欧姆定律 ：;植物细胞特点;植物细胞膜系统和离子通道;离子通道类型;根据生物学功能的特性将离子通道分为三类: ( 1) 电压门控的离子通道,包括Na+、K+、Ca2+ 通道等; ( 2) 受体激活的离子通道, 包括神经递质、激素等外源性化学物质以及机械和渗透压力刺激所激活的离子通道; ( 3) 第二信使激活的离子通道, 包括由细胞内Ca2+、IP3、G 蛋白及蛋白激酶激活的离子通道。;植物细胞离子通道类型;植物质膜上的离子通道;液泡膜上的离子通道;内向型K+通道AKT1结构模型示意图;钙离子通道调节细胞生理活动的模型;离子通道的功能;离子通道与???胞信号转导;离子通道分子水平的研究概况 ;⑺AtKUPI： 该基因是通过校母突变体 互补性分析得到的，呈现 “两相” 形式，从高亲和相﹙Km 为44μM﹚性到低亲合相﹙Km值为11mM﹚ 性的转变范围在100～200μM外界钾离子浓度.高低和 亲系统受到 5mM 和更高浓度的抑制.也受到钾离子通道阻断剂的抑制,在根中表达,不同钾含量的土壤中吸收钾. 木质部壁细胞含有3个阳离子通道： ⑴ KORC： 为外向型钾离子通道, 调节钾从木质部壁细胞释放到导管中. ⑵ KIRC：为内向型钾离子通道,调节钾从木质部转移到周围壁细胞重新吸收 ⑶ NORC： 非选择性外向整流阳离子通道，能把盐分释放到木质部的导管，还负责电信号和水力学信号的传导。; 离子通道问题和展望 ;膜片钳技术由来;膜片钳技术原理;膜片钳记录方法;全细胞钾离子通道电流;膜片钳（仪器）;膜片钳放大器、操作系统;低温水浴摇床;材料的好坏直接影响膜片钳实验的成败！;实验试剂;（1）在28℃、60转/分的摇床上用酶解液解离0.5-2小时左右，根据不同消化时间的细胞状态判断消化程度，在显微镜下清晰地看到游离 细胞。 （2）用200目尼龙网过滤，基本介质冲洗后60g离心7-10分钟，弃去上清液，再用50％基本介质洗涤2-3次，最后将原生质悬浮于溶液中，0～4℃静置恢复。;膜片钳技术简述;（1）玻璃微电极使用硬质有芯玻璃毛细管在拉制仪（PC-10,Narishige）上拉制，实验前用抛光仪（MF-900，Narishige）进行抛光。 （2）通过显微操作系统将电极在加正压情况下轻微压在细胞上，再加以负压使电极尖端与细胞膜形成高阻封接。一般情况下，高阻封接在1-3GΩ之间，刺激电压从-190mV逐级去极化到+110mV，每级为+20mV，维持时间3秒，频率为0.2Hz。全细胞封接形成10分钟后采集数据。;膜片钳技术简述;EPC-9操作界面;膜片钳技术简述;膜片钳技术简述;膜片钳技术简述;膜片钳技术简述;膜片钳技术简述;膜片钳技术简述;膜片钳技术简述;膜片钳技术简述;膜片钳结果分析;膜片钳技术简述;;膜电流：指流过细胞膜上所有活动性离子通道的复合电流。 浓度梯度：膜两侧离子的浓度差，即化学势梯度。 电位差：即电势差，跨过膜的电位差。 平衡电位：离子跨膜流动所需的电位差。 离子的选择性：是通道的开放，能够选择一种离子通过而不选择另一种离子。 门控：指离子通道的开放和关闭。 电压依赖性门控：离子通道开放和关闭的频率取决于膜电位。 静息电