天然产物化学成分预试验与结构鉴定.pptVIP

第一章 天然产物化学成分的预试验与结构鉴定 河南科技大学林业职业学院 刘耀玺 内容提要 1、预试验的目的 2、感觉试验 3、预试验的方法 4、天然产物化学成分的结构鉴定方法 一、预试验的目的 天然产物化学成分预试验的目的： 就是通过一些简单、灵敏、快速、可靠的方法，可以预先知道生物体中某类成分的存在与否、或某一生物体都含有哪些类型的成分，借以了解其中所含成分的概貌以及某种成分的存在分布情况，以便设计科学合理的研究方案。 二、感觉试验 在作预试验之前，除对生物体的产地、生物学特性、分类学鉴定等了解外，首先对生物样品所含成分作初步的观察。因为各种生物成分常常可以借助其外观、色泽、气味、味道等作以初步判断，为进一步的检查提供参考。 以植物为例： (1)颜色：植物组织的断切面如呈橙黄、棕黄色，预料可能有羟基蒽醌类衍生物。如有白色粉屑出现，可能有淀粉、糖存在。 (2)嗅觉：如果断面有油点，并有特殊香气，则考虑除油脂外，还可能有芳香油、香豆素、内酯和某些挥发性成分存在。 (3)味觉：如味苦，可能有生物碱、苷类、苦味质（amaroid)存在。如有收敛性涩味，可能有鞣质。如有甜味，可能含糖类，甘草皂苷等。如味酸且带凉爽感觉，可能含有柠檬酸、苹果酸等羟基酸；若酸带愉快的感觉，可能含有谷氨酸、丁氨二酸以及甜菜碱等。 三、预试验的方法 天然产物成分预试验方法的基本原理是根据各成分极性的不同，先系统地分成几个不同部分，然后利用显色反应或沉淀反应，或结合纸色谱、薄板色谱，定性判断各部分中可能含有的化合物类型。 天然产物成分的预试验、主要分为两类： 一是单项预试法，即根据工作需要有重点地检查某类成分。例如某一植物中是否含有生物碱，可以对其浸提液进行生物碱的定性反应或层析检验。 另一类是系统预试法（又称系统分析），即对某一生物体中的各类成分进行比较全面的定性检查。 （一）预试验前处理的一般流程 常用递增极性的溶剂法，即根据植物成分亲脂性强弱的程度，选用各种极性不同的溶剂，依次进行提取，使之分为若干部分。 根据相似相溶的原理，极性大的成分在极性溶剂中溶解度大，极性小的成分则易溶于非极性溶剂。选择适当的溶剂，极性由小到大，或由大到小，可顺次将极性比较相近的成分分开。 常用溶剂的极性次序为（从小到大）： 石油醚＜环己烷＜苯＜氯仿或二氯甲烷～乙醚＜乙酸乙酯＜正丁醇＜丙醇、乙醇＜甲醇＜水＜含盐水 方法： 1、一般情况是依次用石油醚、乙醚、乙醇、水等溶剂提取，亲脂性强的成分（如油脂、挥发油、甾醇等）就可能溶于石油醚中而被提取出，乙醚溶液中则可能含有内酯、黄酮、醌和弱碱性生物碱等亲脂性成分。乙醇可提取出苷类、生物碱、氨基酸、酚酸、鞣质等亲脂性弱的成分。水溶性成分（蛋白质、氨基酸等）则能溶于水中而被提取出来。 溶剂和有效成分极性相似对照表 （p10) 2、首先选用甲醇、丙酮等弱亲脂性溶剂提出绝大多数成分，其次用酸性水溶液温浸提出多糖、蛋白质等。所得总提物的酸性水溶液用乙醚氯仿混合提取，可得到酸性与中性成分，碱性成分则留在酸性水溶液中不被提出。然后再依据酸性成分能溶于碳酸钠的水溶液的性质与中性成分分离。酸液碱化后再用氯仿提取，可得碱性成分，与水溶性成分相分离。挥发油成分可通过水蒸气蒸馏而得以与非挥发性成分分离。 鉴别流程如下： 将上述分开的各个部分，依照其可能含有的成分类型，选择各类成分特有的化学反应如显色、沉淀等作一般性预试，预试中常用定性反应见下表： 一般定性试验可初步验证有无上述各类物质。（p11) 生物碱 常用碘化汞钾和碘化铋钾（Dragendorff试剂），前者与生物碱试液产生白色沉淀，后者与生物碱试液显棕黄色或橘红色沉淀，反应在滤纸上试验更为敏感和清晰。 黄酮 将乙醇液加Mg粉，滴入浓盐酸后振荡，在泡沫处呈桃红色，或与1 %AlCl3乙醇溶液呈黄色，在紫外等照射下可显示明显的荧光。 皂苷 水溶液振荡时能产生大量持续性泡沫；在醋酐介质中，滴加浓硫酸，呈紫红色反应。 甾体 在碱性介质中，间二硝基苯试剂呈黄褐色或紫色反应。 氨基酸和肽 与茚三酮反应显蓝色或紫红色。 蛋白质 以双缩脲反应（NaOH+CuSO4）显紫红色。 有机酸 与溴酚蓝反应呈黄色或用PH试纸检验。 酚类 与FeCl3显紫色、蓝色。与香草醛盐酸溶液呈红色反应。 糖和苷 与斐林试剂作用有砖红色Cu2 O沉淀。 3、三段法 P10表仅适用于极性从小到大的预试验，实际工作中，根据水可提取极性物质，石油醚可提取非极性物质，醇能提取大部分成分的特点，采用石油醚、水、95％乙醇的三段法进行粗分，提高工作效率。预试验流程如p11图2-1 ： 4、Stasotto法 它的依据是： ①植物提出物的酸性水溶液用乙醚提取，能溶出一些中性和酸性成分