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梨离体保存材料遗传差异分子检测
摘 要
‘金花’和离体保存5年的‘身不知’为试验材料，其中离体保存时间分别为26、30和34
和Co为对照。在对两种标记方法的反应体系进行优化的基础上，采用最佳反应体系
研究了不同保存时间的离体材料的遗传差异。其主要结果表明：
2．适合梨ISSR扩增的最佳反应体系为20吐反应体系中含模板DNA30ng，
测其扩增产物。
均低于离体保存60个月的C组的PPB，材料离体保存时间越久，其出现多态性条带的
个月的A组和B组内田间材料和离体材料的遗传距离均低于离体培养60个月的c组内
田间材料和离体材料的遗传距离，材料保存时间越长、继代次数越多，与田间材料的
遗传距离就越大。
其间的遗传距离越大。
虽然离体培养材料和田问材料有一定程度的遗传差异，但它们之间的遗传距离远
小于品种之问的遗传距离，其差异与离体培养过程中的生长调节剂、外植体的取材部
位等有关。
测不到的位点，比RAPD能在更多位点扩增出条带，获得更丰富的多态性，表明ISSR
更适合于梨的遗传多样性分析。
关键词：梨； 离体培养； 遗传差异； RAPD标记：ISSR标记
Genetic ofinvitrocultureof detected
diversity PyrUS by
markers
molecular
GanLing
andHorticulture 625014)
University，Ya’all，Sichuan
(Forestry College，SichuanAgricultural
Abstract
threedifferentvarietiesof
Applying
for3to5 andtheir in
cultivated／nvitro years pZantsvivo勰experimental
asRAPDandISSRwereusedtodetect
kindsofDNAmolecularmarker such
techniques
showedthat：
the betweentheinvitroandivivo results
diversity plants．The
genetic
and for were
reactionofRAPD-PCR
1．The system pear
optimBm program
mm01．L．1，RAPD mmol·L．I，Taq-DNApolymerase
primer0．5¨m01．L．1，dNTPs0．5
at at at
Was for5min94℃；lmin94C，Imin
1．0U．Amplifiedprocedureprogrammed
a
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