hpv18 e2与il审审12联合核酸疫苗的免疫效果初步研究-preliminary study on immune effect of hpv 18e2 and il trial 12 combined nucleic acid vaccine.docx

PAGE PAGE 10 常 用 英 文 缩 写 缩写词 AA/aa 全称 amino acid 中文名称 氨基酸 A450 BLAST absorbance at 450 nm basic local alignment search tool 450nm 处吸光度 基本局部相似性比对搜索工具 bp base pair 碱基对 BSA bovine serum albumin 牛血清白蛋白 CTL cytotoxic lymphocyte 细胞毒性 T 淋巴细胞 dNTP deoxynucldeoside triphosphate 脱氧三磷酸核苷酸 DMEM dulbecco′s modified eagle medium 达尔伯氏改良培养基 DMSO dimethyl slfoxide 二甲基亚砜 DNA deoxyribonucleic acid 脱氧核糖核酸 DTT dithiothreitol 二硫苏糖醇 EB ethidium bromide 溴化乙锭 ECL Enhanced chemiluminescence 增强化学发光 EDTA ethylene diamietetraacetic acid 乙二胺四乙酸 ELISA enzyme linked immunosorbent assay 酶联免疫吸附试验 FITC fluorescein isothiocyanate 异硫氰酸荧光素 HRP horseradish peroxidase 辣根过氧化物酶 IFN-γ interferon–γ γ-干扰素 IL-12 interleukin-12 白细胞介素-12 IL-4 interleukin-4 白细胞介素-4 IPTG isopropythio-β-D-galactoside 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷 kD/kDa kilodalton 千道尔顿 MHC major histocompatibility complex 主要组织相容性复合体  MTTOD3-(4, MTT OD 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-di- 3-(4,5-二甲基噻唑 -2)2, phenyltetrazolium bromide 基四氮唑溴盐 optical density 光密度 polyacrylamide gelelectrophoresis 聚丙烯酰胺凝胶电泳 phosophate buffered saline 磷酸盐缓冲液 polyethylene glycol 聚乙二醇 phenylmethanesulfonyl fluoride 苯甲基磺酰氟 polymerase chain reaction 聚合酶链反应 ribonucleic acid 核糖核酸 ribonuclease 核糖核酸酶 revolutions per minute 每分钟转数 PAGE PBS PEG PMSF PCR RNA RNase rpm RPMI- 1640 roswell park memorial institute 1640 RPMI-1640 培养基 medium SDS sodium dodecyl sulphate 十二烷基硫酸钠 SI stimilation index 刺激指数 TBS tris-buffered saline Tris 缓冲盐溶液 TE Tris/EDTA buffer Tris/EDTA 缓冲液 TEMED N,N,N’,N’ -tetramethylethylenediamine N,N,N′,N′-四甲基乙胺 Th helper T lymphocyte 辅助性 T 细胞(Th 细胞) Tris Tris-(hydroxymethyl) aminomethane 三羟甲基氨基甲烷 WHO World Health Organization 世界卫生组织 HPV18 E2 与 IL-12 联合核酸疫苗的免疫效果初步研究 硕士研究生：阳帆 导 师：万艳平 教授 中 文 摘 要 目的： 构建 人 乳 头 瘤 病 毒 18 型 (HPV18)E2 基 因 真 核 表 达 载 体 pcDNA3.1(+)/E2，将其与 IL-12 真核表达载体 pcDNA3.1(+)/IL-12 联 合免疫 BALB/c 小鼠，检测小鼠产生的特异性体液免疫和细胞免疫应 答水平，为 HPV18 诱发的宫颈癌治疗性核酸疫苗的研制奠定实验基 础。 方法： (1)用 PRIMER5.0 软件设计 HPV18 E2 基因引物，PCR 扩增 E2 基因， 将其插入 pGEX-6P-2 载体，构建重组载体 pGEX-6P-2/E2，并进行序列 分析。将重组质粒 pGEX-6P-2/E2