h感受器在胞外酸化诱导的培养大鼠心室肌细胞ca2]i增加中的作用及机制-role and mechanism of h receptor in extracellular acidification-induced ca2 ] i increase in cultured rat ventricular myocytes.docx

缩略词表（abbreviation）APB2-aminoethoxydiphenyl borate2-氨基乙氧基二苯基硼酸盐 ASICsacid-sensing ion channels酸敏感离子通道BSAbovine serum album牛血清白蛋白[Ca2+]iintracellular free calcium concentration胞内游离钙离子浓度CAPcyclopiazonic acid门环匹阿尼酸DMSOdimethyl sulfoxide二甲基亚砜EGTAglycol-bis-(2-aminoethylether)-N,N,N,N-tetraacetic acid乙二醇-双-(2-氨基乙醚)四乙酸ENaC/DEGepithelial Na+ channel/degenerin上皮钠通道/退化蛋白FITCfluorescence isothiocyanate异硫氰酸盐G2AG2 accumulation细胞周期G2相停滞GPR4G protein-coupled receptor 4G蛋白偶联受体4HEPESN-2-hydroxyethylpiperazine-N-2-ethanesulfonic AcidN-2-羟乙基哌嗪N-2-乙磺酸HRPhorseradish peroxidase辣根过氧化酶IP3inositol-1,4,5-triphosphate三磷酸肌醇OGR1ovarian cancer G protein-coupled receptor 1卵巢癌G蛋白偶联受体1PBSphosphate buffer solution磷酸盐缓冲液PLCphospholipase C磷脂酶CSDSsodium dodecyl sulfate十二烷基磺酸钠 siRNAsmall interfering ribonucleic acid小分子干扰核糖核酸 SRsarcoplasmic reticulum肌浆网TDAG8T-cell death-associated gene 8T细胞死亡相关基因8 TEMEDN,N,N,N-tetramethylethylenediamine四甲基二乙胺TGthapsigargin门毒胡萝卜素TRITCtetramethyl rhodamine isothiocyanate四甲基罗丹明异硫氰酸盐TRPV1the transient receptor potential vanilloid 1瞬时感受器电位香草酸亚 型-1中文摘要第一部分 ASICs 和 TRPV1 介导胞外酸化诱导的 培养大鼠心室肌细胞[Ca2+]i 增加目的：探讨 ASICs 和 TRPV1 在胞外酸化诱导的培养大鼠心室肌细胞[Ca2+]i 增加中的作用。方法：运用原代培养的大鼠心室肌细胞，采用钙离子成像技术，观察胞外酸化诱 导的心室肌细胞[Ca2+]i 变化。结果：1. 胞外 pH 6.0 和 pH 5.0 诱导心室肌细胞[Ca2+]i 增加，ASICs 非特异性阻断药阿 米洛利（300 μM）和 ASIC1 特异性阻断药 PcTx1（10 nM）对该增加均有抑制作用， pH 6.0 时抑制率为分别为 48.86 ± 6.92% 和 51.25 ± 4.94%；pH 5.0 时抑制率分别为50.07 ± 5.70% 和 53.51 ± 3.31%。2. pH 5.0 诱导的心室肌细胞[Ca2+]i 增加能被 TRPV1 非特异性阻断药钌红（10 μM） 部分阻断，其抑制率为 56.16 ± 6.22%。3. 联合运用阿米洛利（300 μM）和钌红（10 μM）明显阻断 pH 5.0 诱导的心室肌 细胞[Ca2+]i 增加，抑制率为 82.61 ± 4.18%。结论：胞外酸化（pH 6.0 和 pH 5.0）诱导培养大鼠心室肌细胞[Ca2+]i 增加，ASICs和 TRPV1 通过外钙内流途径介导该增加。关键词：培养大鼠心室肌细胞；钙离子成像；[Ca2+]i；ASICs；TRPV1；胞外酸化第二部分 卵巢癌 G 蛋白偶联受体 1（OGR1）介导胞外酸化诱导的培养大鼠心室肌细胞[Ca2+]i 增加目的：探讨大鼠心肌组织和心室肌细胞上是否有 H+敏感的 G 蛋白偶联受体（包 括：OGR1、G2A、GPR4 和 TDAG8 四个亚型，其中 OGR1 和 G2A 主要与 Gq 偶联， GPR4 和 TDAG8 主要与 Gs 偶联）的表达，以及 OGR1 在胞外酸化诱导的培养大鼠心 室肌细胞[Ca2+]i 增加中的作用及机制。方法：应用原代培养的大鼠心室肌细胞，采用 RT-PCR、western blotting 和免疫荧 光等技术，观察 OGR1 在大鼠心肌组织和心室肌细胞的表达情况。采用钙离子成像技 术，