il1b及il1rn基因多态性与结核易感性的相关性研究-study on the correlation between il1b and il1rn gene polymorphism and tuberculosis susceptibility.docx
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il1b及il1rn基因多态性与结核易感性的相关性研究-study on the correlation between il1b and il1rn gene polymorphism and tuberculosis susceptibility
山 东 大 学 硕 士 学 位 论 文
林 杂 交 缓 冲 液
取 。林 混 合 液 体 加 人 到 杂 交 舱 中
放 人 ℃ 恒 温 箱 中
保 温 分 钟 ③
吸 除 杂 交 舱 中溶 液
再 加 人 林 已 预 热 的 号 洗 涤 液
℃ 保 温 分 钟
然 后 吸 除 重 复
两 次 显 色 ① 向 杂 交 舱 中加 人 号 洗 涤 液 林
室 温 放 置 分 钟
吸 除 杂 交 舱 中溶 液
② 加 人 抗 体 液 林
室 温 放 置 分 钟
吸 除 溶 液 ③ 加 人 号 洗 涤 液 林
室 温 放 置
分 钟 再 重 复 次 ④ 加 人 号 洗 涤 液 林
室 温 放 置 分 钟
吸 除 溶 液 ⑤ 向 杂 交 舱 中加
人 林 显 色 液
℃ 放 置 分 钟
检 测 ℃ 烘 干 基 因 芯 片 后
在 加 基 因 芯 片 检
一测 仪 上 进 行 扫 描 测 定
一
结 果 判 定 由 软 件 自动 判 断 并 输 出 结 果
一聚 合 酶 链 反 应
一
限 制 性 片 段 长 度 多 态 性
分 析 提 取 人 类 基 因 组
的 提 取 参 照 已 建 立 的 改 良碘 化 钠 法
扩 增 体 系 扩 增 在 林 反 应 体
系 中进 行
包 括 林 协
卜 柳 各 耐 协
去 离 子 无 菌水 林
恻 林 酶 林
卜 撇 林
扩 增 热 循 环 参 数 续℃ 变 性 然 后 ℃
℃ ℃ 个 循
一 一一环 ℃
一 一
一
℃ 共 个 循 环 ℃
℃ 。 ℃ 共 个 循 环
最 后 ℃ 延 伸 分 钟 酶 切
酶 切 原 理 用
方 法 对 工 一 一
位 点 多 态
性 进 行 分 型 的 基 础 是 工 一 基 因 启 动 子 一 区 域 碱 基 替 换 为
改 变 限 制 性 内切 酶 初 识
别 位 点 顺 序
用 特 异 的 限 制 性 内切 酶 消 化 基 因 产 物
产 生 种
不 同 的 特 异 性 等 位 基 因 片 段 不 能 被 工酶 切 的 一 一 型 只 有 个 片
一 一一酶 切 后 产 生 个 片 段
一 一
一
型 有 巧
个 片 段 酶 切 后 产 生
一 一个 片 段 的 型
一 一
个 片 段
工 一 一
酶 切 原 理 用
方 法 对 工 一 一 基 因 进 行 分 型 的 基 础 是 工 基 因 启 动 子 一 区 域 碱 基 替 换 为 改 变 限 制
性 内切 酶 工识 别 位 点 顺 序
用 特 异 的 限 制 性 内切 酶 工消 化 基 因 产 物
一 一产 生 种 不 同 的 特 异 性 等 位 基 因 片 段 不 能 被 酶 切
一 一
型 只 有 个
和片段 和 一 个 的 小 片 段 酶 切 后 产 生 个 片 段 的 一 一 型
和
一 个 的 小 片 段 酶 切 后 产 生 个 片 段 的 一 一 型 有
和 一 个 的
小 片 段
电 泳 酶 切 产 物 用 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 一 澳 化 乙 锭 染 色 法 分 型 用 的
室 温 下
电 压 电 泳 小 时
然 后 用 凝 胶 成 像 及 分 析 系 统 对 染 色 后 的
凝 胶 进 行 照 相 并 保 存
山 东 大 学 硕 士 学 位 论 文
一白细 胞 介 素
一
基 因 多 态 性 的 检 测 扩 增 条 件 如 下 在 林 反 应 体 系 中进 行
包 括 加 协
, 皿 林
工
林 彻 各
。
耐 卜 去 离子 无 菌水 卜
蒯 卜 酶 林 林 呱 林
扩 增 热 循 环 参 数 ℃ 变 性 然 后 ℃ ℃
℃ 个 循 环 ℃
℃ ℃ 共 个 循 环 ℃ 。 ℃
℃ 。共 个 循 环 最 后 ℃ 延 伸 分
钟 扩 增 产 物 用 一 潮 旨糖 凝 胶 电 泳 检 测 用 的
一 一
一 一
我 们 发 现
各 基 因 型
在 对 照 组 中 出 现 的 频 率 分 别 为
在 病 例 组 中 出 现 的 频 率 分 别 为
两 组 比 较 有 显 著 性 差
异 二
两 组 基 因 型 分 布 不 同 其 中
携 带 竹 纯 合 子 基 因 型 增 加 结 核 风
险 值 为 可 信 区 间
等 位 基 因 工 一 一 和 工卜 一 在 对 照 组
和 病 例 组 中 的 频 率 分 别 为 和
和 分 布 有 显 著 不 同
二 一 一等 位
二
一 一
增 加 结 核 风 险 。
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