il2 il15诱导扩增的脐带血nk细胞生物学特性分析-biological characteristics of umbilical cord blood nk cells amplified by il2 il15 induction.docx

英文缩略词表HLAHumanLeukocyteAntigen人类白细胞抗原HSCHaematopoieticStemCell造血干细胞HSCTHaematopoieticStemCellTransplantation造血干细胞移植Allo-HSCTAllogeneticHaematopoieticStemCellTransplantation异基因造血干细胞移植CBTCordBloodTransplantation脐血移植UCBTUmbilicalCordBloodTransplantation非血缘脐血造血干细胞移植PBSCTPeripheralBloodStemCellTransplantation外周血干细胞移植BMTBoneMarrowTransplantation骨髓移植GVHDGraftVersusHostDisease移植物抗宿主病GVLGraftVersusLeukemia移植物抗白血病IL-2interleukin-2白细胞介素-2IL-15interleukin-15白细胞介素-15KIRKillercellImmunoglobulin-likeReceptor杀伤细胞免疫球蛋白样受体NCRNaturalCytotoxicityReceptors自然杀伤细胞受体MHCMajorHistocompatibilityComplex主要组织相容性复合体NKcellnaturalkillercell自然杀伤细胞CLRC-typelectin-likereceptorC型凝集素样受体GraBGranzymeB颗粒酶B□CTLcytotoxiclymphocyte,CTL细胞毒性T淋巴细胞IFN-γInterferon-gamma干扰素-γTNF-αTumornecrosisfactor-alpha肿瘤坏死因子-αCD62LlymphnodehomingreceptorsL-selectin淋巴结归巢受体L选择蛋白PBSphosphatebuffer磷酸盐缓冲液IL-2、IL-15诱导扩增的脐带血NK细胞生物学特性研究中文摘要目的本研究探讨脐带血表型为CD3-CD56+的NK细胞以及经IL-2、IL-15诱导扩增后免疫表型与细胞毒活性等生物学改变的特性。方法使用Ficoll淋巴细胞分离液分离出脐带血单个核细胞，在无血清培养的条件下，分别加入IL-2、IL-15、IL-2联合IL-15，在培养箱中培养14天，流式细胞仪检测CD3-CD56+NK细胞亚群含量以及NK细胞上CD16、CD62L、NKG2D、NKG2A、NCR44、NCR46、颗粒酶B、穿孔素的表达情况；并且使用WST-1法检测培养后的NK细胞对K562细胞毒活性。结果经过14天的培养，扩增后的IL-2、IL-15、IL-2/IL-15三组NK细胞分别扩增了10.78±2.51、10.42±3.72、10.54±6.24倍,这三组之间无显著差异；扩增后的CD3-CD56+NK细胞表达CD16的比例有显著减低，IL-2和IL-15组之间差异显著；使用细胞因子扩增后的NK细胞中CD62L的表达未曾改变；使用IL-2扩增后，NKG2A、NCR46表达有所下调，而使用IL-15扩增后则发生相反的作用；IL-2和IL-15两种细胞因子均有上调NKG2D、穿孔素、NCR44表达的作用，且细胞因子之间也存在差异；IL-15有上调NK细胞颗粒酶B的表达作用；细胞因子扩增的NK细胞毒活性显著增高，但细胞因子之间无显著差异。结论在无血清培养条件下，IL-2和IL-15都能使脐带血中NK细胞出现有效地扩增。虽然CD3-CD56+NK细胞经过两种细胞因子扩增后，与其功能相关的免疫表型呈现出不同的改变特征，但其细胞毒活性均显著增加，且两种细胞因子之间无显著差别，协同作用不明显；NK细胞毒活性是各种活性分子共同作用的结果。关键词脐带血；NK细胞；IL-2；IL-15；免疫表型；细胞毒性英文摘要StudyonbiologicalcharacteristicsofinducedandamplifiednaturalkillercellswithIL-2andIL-15fromthecordbloodAbstractObjectiveToinvestigatetheamplificationofCD3-CD56+NKcellsderivedfromumbilicalcordbloodandtheirimmunophenotypeandcytotoxicitychange.MethodsMononuclearcellswereisolatedfromumbilicalcordbloodandculturedinserum-freemediumsuppliedwithIL-2or/andIL-15