il3rα异构体sp1 sp2在急性髓系白血病细胞的表达及其对预后的影响-expression of il3r α isomer sp1 sp2 in acute myeloid leukemia cells and its influence on prognosis.docx

目录目录I常用英汉缩略词表II摘要IIIAbstractV引言1材料和方法3结果13讨论24结论28致谢31综述32I常用英汉缩略词表英文缩写英文全称中文注释AMLacutemyeloidleukemia急性髓系白血病APLacutepromyelocyticleukemia急性早幼粒细胞白血病LSCsleukemiastemcells白血病干细胞HSCshematopoieticstemcells正常造血干细胞PBSphosphate-bufferedsaline磷酸缓冲盐溶液DEPCdiethylyrocarbonate焦碳酸二乙酯reversetranscriptionpolymerasechainRT-PCRreaction逆转录聚合酶链反应IL-3interleukin-3白介素-3IL-3Rinterleukin-3receptor白介素-3受体WBCwhitebloodcount白细胞计数HBhemoglobin血红蛋白PLTplatelet血小板CRcompleteremission完全缓解OSoverallsurvival总生存率IIIL-3Rα异构体SP1、SP2在急性髓系白血病细胞的表达及其对预后的影响摘要目的：研究初治急性髓系白血病患者白血病细胞hIL-3Rα异构体SP1、SP2表达水平与其临床特征及血清IL-3水平的相关性；并在体外培养条件下，研究SP1的特异性抗体7G3对白血病原代细胞增殖、分化的影响。方法：1.用荧光定量RT-PCR检测77例急性髓系白血病患者骨髓或外周血未分选的单个核细胞和11例经分选的CD34+白血病细胞hIL-3RαSP1、SP2转录水平的相对表达量，同时以14例正常人脐带血CD34+细胞作为对照；2.WesternBlot鉴定SP1在蛋白水平的表达；3.ELISA法检测急性髓系白血病患者血清IL-3浓度，并以14例正常人血清为对照；4.建立原代白血病细胞体外培养体系，应用Brdu法及瑞氏吉姆萨染色法检测SP1的特异性抗体7G3对白血病原代细胞增殖、分化情况；5.采用SPSS17.0软件进行统计学分析，两组间相关性分析采用spearman秩相关分析，多组间相关性分析采用Kruskal-Waillis分析；缓解率分析采用χ2检验；总生存率分析采用KaplanandMeier分析，并用Log-rank检验；多变量分析采用降维分析-最优尺度分析。P0.05认为差别具有统计学意义。结果：1.AMLCD34+白血病细胞群SP1的表达水平比正常CD34+细胞群高（P=0.0109），亦高于未分选的白血病细胞群（P=0.0243），而SP2无此结果。2.AMLSP1的高表达与高白细胞数、高幼稚细胞比例相关，且高表达SP1的AML(non-APL)患者比低表达者具有更低的总生存率（P=0.0307），AML白血病细胞SP2的表达与白细胞数（r=0.235，P=0.039）、幼稚细胞比例（r=0.228，P=0.047）呈正相关，但未发现与总生存率有明显相关。3.7G3阻断hIL-3RαSP1后，对外源性IL-3反应性较好的原代白血病细胞增殖均出现不同程度的下降，而对外源性IL-3反应性较差的细胞增殖无明显改变。尚未发现阻断SP1后细胞形态学发生明显变化。4.AML细胞体外自身增殖能力与对外源性IL-3的反应性存在非线性相关，即在体外自身增殖能力强的细胞对外源性IL-3的反应性较低，而细胞体外自身III增殖能力弱时，与对外源性IL-3的反应性无明显相关；患者血清IL-3含量与CR存在的非线性相关，即在血清IL-3超过正常群体中位值的样本中，IL-3含量高的患者CR率较低，而低于正常中位值的样本中，血清IL-3含量与患者CR率无明显相关；AML细胞体外自身增殖能力与患者的缓解率存在非线性相关，即在白血病细胞体外自身增殖能力超过群体中位值的样本中，白血病细胞自身增殖能力较高的患者CR率较低，而自身增殖能力低于群体中位值的样本中，白血病自身增殖能力与患者CR率无明显相关。结论：AMLCD34+白血病群SP1的表达水平较正常CD34+细胞高，亦高于未分选AML白血病细胞，并可作为提示患者预后的指标。关键词：急性髓系白血病，IL-3Rα，异构体，增殖，分化IVExpressionofhIL-3RαIsoformsSP1andSP2intheAcuteMyelogenousLeukemiaandItsPrognosticValuetothePatientsAbstractObjective:TheaimofthestudytoexploretherelationshipsbetweenexpressionlevelofthehIL-3receptorsαisoformsSP1andSP2andthecli