il17作为分子佐剂增强hiv核酸疫苗细胞免疫应答的研究-study on il 17 as molecular adjuvant to enhance cellular immune response of hiv nucleic acid vaccine.docx

摘要IL-17家族成员在适应性免疫反应中起着重要的作用，同时在某些病原体侵入机体后，它们在适应性免疫和固有免疫之间也起到了关键的协调作用，人们对于这些作用的了解越来越多。IL-17在不同的自主免疫疾病中也起到了重要的介导作用。它是由一群特殊的CD4+T(T辅助)细胞亚群所分泌的一种细胞因子，在机体主动防御中起着重要的作用。所以，设想IL-17可以作为佐剂增强HIV疫苗的免疫效果。为了进一步增强HIV核酸疫苗的免疫反应，本研究将IL-17作为HIV核酸疫苗的分子佐剂免疫小鼠，旨在探讨IL-17对HIV核酸疫苗诱导体液和细胞免疫应答的影响。将小鼠IL-17构建到真核表达载体，与HIV膜蛋白DNA疫苗pGX-Env联合免疫BALB/c小鼠；以抗-EnvIgG、细胞因子表达水平和体内细胞毒性T淋巴细胞杀伤作用(CTL)等为免疫学指标，分别在第0、2周进行免疫，在第4周检测T淋巴细胞增殖指数。作为HIVDNA疫苗在IL-17作用下能够增强特定的免疫反应。与单注射疫苗组相比，IL-17做为佐剂组的T细胞增殖、抗体水平和CD4+T细胞分泌IFN-γ、IL-4和IL-17的表达均无显著性增强，但对CD8+T细胞分泌IFN-γ的表达和体内CTL的效果影响明显(P0.05)。实验数据显示，IL-17作为分子佐剂不足以影响Th细胞分化，然而却能够增强特异性CD8+T细胞中IFN-γ的表达，尤其是增强体内CTL反应。此结果为增强艾滋病DNA疫苗CD8+T细胞活性和用于艾滋病的治疗提供了一个新的思路。关键词：IL-17；HIV；DNA疫苗；分子佐剂AbstractMembersoftheIL-17familyarecentralplayersinvariousarmsoftheadaptiveimmuneresponseandhavebecomekeytoanexpandedunderstandingofcytokinenetworksthatcoordinateinnateandadaptiveimmunitytocertainpathogens.IL-17cytokinesarealsokeymediatorsinadiverserangeofauto-inflammatorydisorders.IL-17isproinflammatorycytokinesecretedbyauniqueCD4+T(T-help)cellsubsetandproposedtoplayaroleinhostdefense.WehypothesizedthatIL-17asamolecularadjuvantonenhancingimmuneresponsestoHIVDNAvaccination.ToimprovetheimmuneresponsetoHIVDNAvaccine,weinvestigatedIL-17asadjuvanteffectonthehumoralandcellularimmuneresponsestoHIVDNAvaccinebyimmunizingmicewithHIVDNAvaccineplusIL-17.WeimmunizedtheBALB/cmicewithpGX-Envalone,orwithpcDNA3-IL-17byintramuscularinjection.Theimmunizationwasperformedonweek0,2.Theconcentrationoftheanti-EnvIgG,thestimulatedindexofTlymphocyteproliferation,andtheexpressionofIFN-γ,IL-4andIL-17inCD4+TcellandIFN-γinCD8+Tcell,specificinvivocytotoxicTlymphocyte(CTL)activityweredetectedatweek4.WeshowherethatIL-17asamolecularadjuvantwiththeHIVDNAvaccine,pGX-Env,canenhanceimmuneresponses.Interestingly,IL-17hasnoadjuvanteffectontheresponsesforTcellproliferation,antibodyproductionandexpressionsofIFN-γ,IL-4andIL-17inCD4+Tcells,butratherontheup-regulationofIFN-γinCD8+TcellsandCTLinvivosignificantly(P0.05).ThedatasuggestthatIL-17asthemolec