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微生物发酵工程课件第15章 发酵的实验室研究和 与放大.ppt
第十五章 发酵过程的实验室研究、中试和放大
(Research in Lab. and Scale up);?
工业发酵过程的研究,一般分为三种规模或三个阶段:
① 实验室规模,进行菌种的筛选和培养基的研究;
② 中试工厂规模,确定菌种培养的最佳操作条件;
③ 工厂生产规模,进行大规模生产,取得经济过程。
微生物培养过程的研究有两个主要作用:
一是将科研所得的新方法应用于工业生产;
二是通过试验找到更好的菌种、更佳的培养基和培养条件以及更好的设备去改进现行的生产。; 一个优秀的工业微生物学家,首先要在实验室对已筛出的新菌种(或改良后的新菌株)进行开发研究,获得高产基因表达的最佳条件,再逐步转移到工厂生产中去,并能得到重现,也就是所说的新发酵工艺的放大;或者是,在现有生产中如何将实验室所取得的培养数据转化(或放大)成生产工艺,达到工艺改革的目的。无论是何种情况,都要涉及到实验室的研究和研究结果的放大。
;(一) 实验设备
实验室研究所用的培养仪器和设备,如培养皿、培养箱等,已在微生物教科书和实验中介绍和使用过,这里就不再叙述。绝大多数是需氧发酵,所以,对沉没(深层)液体培养来说,有气体自然交换的摇瓶发酵和强制通气的发酵罐发酵。前者需要摇瓶机,后者需要容量大小不同的发酵罐
摇瓶机有往复式和旋转式两种。它们由3-4 个主要部件所构成,有支持台、电动机、控制系统等可装有不同数量和不同大小的摇瓶,有250,500,1000ml的摇瓶,还有供种子液的4L大的摇瓶。
;1. 摇瓶培养装置
摇瓶 大小 每台振荡机 500ml 烧瓶的装置 转速 用途
锥形 大 100-200 筛选和开发
烧瓶 小 10-20 200 - 500r/min
2. 实验室-中间工厂设备
搅拌 工作容积 搅拌器 用途
发酵罐 大小 (L) (直径;转速)
小 1-3 7-8cm; 500-1000r/min 研究试验
中 10-30 10-15cm; 250-600 r/min 开发和制备
大 500-2000 开发和提取 ; 2. 水蒸发的影响
摇瓶在振荡期间, 其中的水分经由瓶塞而蒸发的问题不能忽视。由于水分的蒸发,往往产生各种不同的影响,既影响培养液的体积与摇瓶体积的比值,继而改变氧传递速率,又改变菌体产物的浓度。水蒸发量与发酵温度、周围空气的相对湿度和水汽的传递系数等因素有关。
如同上述试验,与300C,相对湿度为29%的室中进行试验,通过摇瓶内水重量的减少测定棉塞的水汽传递系数 (Kc)H2O为18~21cm3/min,相当的水蒸发量为0.6~0.7g/d。具体结果见上图。各种菌株摇瓶发酵的水蒸发量需由试验来测定。如红霉素链霉菌于340C,100ml摇瓶中装入20ml培养基,经162小时振荡培养,测定的水蒸发量约为10ml,在发酵起始时,补加10ml水,取得的红霉素产物的最高发酵单位。同时发现,接种后的水蒸发量常常高于没有接种的蒸发量。; 3. 比表面积的影响
摇瓶发酵所需的氧是由表面通气供给的。它的氧传输速率的大小是由:
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