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凡纳滨对虾精氨酸激酶的多克隆抗体制备及组织特异性表达分析
33 6 V ol. 33, No. 6
2009 11 JOURNAL OF FISHER IES OF CH INA Nov. , 2009
: 1000- 0615( 2009) 06- 1026- 05
姚翠鸾, 冀培丰, 孔 鹏, 王志勇
( , , , 361021)
: 精氨酸激酶( arg in ine k inase, AK)在调节无脊椎动物磷酸精氨酸与ATP之间能量平 的
过程中具有重要作用在前期工作基础上, 设计特异引物, 以凡纳滨对虾肌肉组织 cDNA 为
模版, 克隆得到了 1 0 1 bp的凡纳滨对虾精氨酸激酶的完整开放阅读框; 将它克隆到原核表达
载体 pGEX4T2上, 转化 BL 21 (DE 3) 菌株, 经诱导后表达出G STAK 融合蛋白以纯化的
融合蛋白作为抗原免疫小鼠, 制备多克隆抗血清, 经检测该抗原与抗体识别良好利用得到的
抗体对凡纳滨对虾AK 在蛋白质水平上的特异性表达进行分析发现, 精氨酸激酶在对虾的肌
肉心脏神经血细胞和胃组织中具有高的表达量, 而在眼柄肝胰腺鳃和皮肤组织中表达量
较低为进 一步研究精氨酸激酶在对虾体内的功能奠定了基础
: 凡纳滨对虾; 精氨酸激酶; 多克隆抗体; 组织表达
: Q 85; S 91 : A
[ 3- 8]
(L itopenaeus vannam ei), ,
, [ 9]
,
[ 1]
, , ,
, ,
, [ 9]
,
, , ,
, cDNA,
, AK
( argin ine kinase, AK, EC 2. . , ,
3. 3) ATP
, , ,
, ATP ,
[ 2]
,
+
+MgADP+H +MgATP
1
, 1. 1
, , BALB /c
: :
: ( 360 1605); ( 2006CB101804); ( 2006A001)
: , Em ai:l zyw ang@ jm u. edu. cn
6 , : 102
, ( 11. 6 ! 2) cm, ( 12.
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