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抗肿瘤药物2me纳米干混悬剂的研究-study on anti-tumor drug 2me nano-dry suspension
则原创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究所取得的成果。除文中巳经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人戚集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任山本人承担。学位论文作者:日期:年月日学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品,知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定,问意学校保留或向国家有关部门戚机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅:本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时,第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定.学位论文作者:H期:年月H摘要摘要2-申氧基雌工醇(2-Methoxyestradiol,2-M凹,作为雌二醉的内源性代谢物,因其具有广谱抗肿瘤活性,且毒性较低,近年来被广泛关注,口服胶囊己被FDA批准进行二期临床研究。2-ME在水中难溶,半褒期短,体内又易快速控基化、脱氧而形成非活性代谢物,且存在明显的肝首过效应,难以维持有效血药浓度,致使其口服生物利用度较低,同时I期临床结果表明其口服吸收无规律,药代动力学参数与剂量之间缺乏相关性。为了解决各ME水中难溶、肝首过效应及生物利用度低的问题,结合纳米混悬剂这种新型给药系统的特点,本文采用纳米沉淀刷超声粉碎法制备2-ME纳米混悬液,从体内、体外对其进行了系统地研究和探讨,以期为2-ME的开发和临床应用提供更多借鉴,现将本文的主要研究内容摘要如下:1.2-ME纳米干棍悬剂的制备和表征。采用纳米沉淀超声粉砰法制备2-ME纳米混悬液,冷冻干燥后所得粉末可成功地提高药物的溶出速度,在最初的10min内,其溜出速率是2-ME原料药的45倍以上,体外溶出速率的增加将有利于药物生物利用度的提高。制备的纳米混悬剂以粒径和电位为评价指标,用扫描电镜、差示扫描最热法及X射线衍射法进行了表征。结果表明,2-ME纳米干混悬剂虽无定形粉末状,复溶后平均粒径(244.5:t5.8)nm(PDI0.23士0.02),电位(-34.4土2.2)mV,物理稳定性研究显示,4C放费6个月后粒径和药物含量均未见明显变化。2.2-ME纳米混悬液大鼠体内药动学和组织分布研究。以SD大鼠为试验对象,通过尾静脉注射给药(10mglkg),采用HPLC法测定不同时间点大鼠血浆及各组织中的药物浓度,以此评价2-M巴纳米混悬液(正电荷、中性和负电荷)和2-ME普通溶液的体内行为。结果表明2-ME制成纳米混悬液后,其体内行为发生改变。2-M巳N(2-ME纳米混悬液,街负电)的T1/2a、Tl/28和V(c)分别是2-ME-S(2-ME溶液)的1.67、2.23和3.18倍,具有一定的缓释效果。负电荷2-ME-N相比于正电荷2-ME-N具有较高的Tl刷、Tl/2?和V(c)但二者AUC之间无统计学差异。体内分布结果表明,中性2-M臣-N在牌、心和肝中分1p较多,肾中分布最少,没有明显的靶器官:正电荷2-ME-N在牌中的浓度最高,摘要牌的总靶效率为51.24%;负电荷2-M览-N对肺、肝和脾等组织具有良好的选择性,其中肺的靶向性效果显著,总靴效率达82.72%,比2-ME溶液肺的TEC值(47.69%)增加35.03%。3.2-ME纳米混悬液体外细胞毒作用研究。应用M1T法对各M臣-N(负电荷)在体外对人食管癌EC9706细胞的细胞毒作用进行研究。结果显示,与鸟M巴S相比,2-ME-N对细胞的生长抑制作用明显增强,2-ME-S的ICso值是2-M巳N的2.29倍。4.2-ME纳米混悬液对裸鼠人食管癌移植瘤抑制作用研究。裸鼠皮下接种EC9706细胞建立裸鼠移植瘤模型,30只荷瘤裸鼠随机分为5组,每组6只,分别为阴性对照组,阳性对照组(5-FU-S,20mgkg-1d勺,2-ME.N低、中、)商剂量治疗组(15,30,ωmg.kg-1.d-10治疗7d厉处死裸鼠,剥离瘤体称重并计算抑瘤率。TU阳L法检测肿瘤细胞凋亡指数,免疫组化SP法检测移植瘤组织VEOF、EOF、K-i67和HIF-la的表达。结果表明,阳性对照组和2-M巳N低、中、高剂量组均能抑制肿瘤的生长,抑瘤率分别为67.76%,27.47%,63.63%和78.42%,与阴性对照组比较均有显著性差异,2-ME-N低、中、高剂量组肿瘤抑制率是现剂最依赖性。2-ME各剂量组的凋亡指数分别为(25.1士2.5)%、(39.4土5.1)%和(63.1土4.3)%,与阴性对照组(11.5土1.6)%比较,差异具有显著性(P0.05或PO.01
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