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- 2018-05-28 发布于河南
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昆明爱科特生物科技有限公司β甘露聚糖酶
昆明爱科特生物科技有限公司β-甘露聚糖酶酶活力测定方法
β-甘露聚糖酶酶活力的测定(DNS 法)
1 β-甘露聚糖酶酶活力单位定义
在 37℃、pH 值为 5.5 的条件下,每分钟催化浓度为 9mg/mL 的甘露聚糖溶液
生成 1 μmol 甘露糖所需的酶量定义为一个 β-甘露聚糖酶酶活力单位 IU。
2 测定原理
β-甘露聚糖酶可将甘露聚糖水解为寡糖和单糖。含有游离醛基或酮基的寡糖
和单糖在碱性沸水浴的条件下与 3,5—二硝基水杨酸反应生成橘红色的 3-氨基
-5-硝基水杨酸。该化合物在 540nm 处有最大吸收,在一定的浓度范围内还原糖
的量与光吸收值呈线性关系。而反应液中还原糖 (以D-甘露糖计)的生成量又
与β-甘露聚糖酶的酶活力成线性关系。因此,可通过分光比色法测定反应液的
光吸收值,利用标准曲线方程来计算反应液中还原糖的含量,进而反映出β-甘
露聚糖酶的酶活力。
3 仪器与设备
3.1 实验室用样品粉碎机或研钵。
3.2 分样筛
孔径为 0.25mm (60 目)。
3.3 分析天平
感量 0.001g。
3.4 pH 计
精确至 0.01。
3.5 磁力搅拌器(带有加热功能)
3.6 涡旋混合器
3.7 烧结玻璃过滤器
孔径
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