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锦鲤疱疹病毒病研究进展 　　我国是水产养殖大国，近30年来水产业发展尤为迅速，目前水产养殖产量已经超过捕捞产量，约占养殖业的70%以上。但是，随着水产养殖业的迅速发展，一些水产疾病的爆发也越来越频繁。据统计，至2002年全国水产病害达到185种，直接造成经济损失141亿元。目前，水生动物疾病种类繁多，且发病时间延长、传播速度快，危害程度大，发病后死亡率高。更严重的是已经有所控制的严重疾病有返强趋势，近年来，在吉林、辽宁等地区的网箱养殖发展迅速。随着淡水养殖业的迅速发展，各种疾病造成的损失也迅速上升。尤其是近年来发生的锦鲤疱疹病毒病，给鲤鱼养殖业带来了巨大的经济损失。2007年，我国质检总局要求停止从日本和印尼进口锦鲤和鲤鱼，将锦鲤疱疹病毒作为必检项目。 　　锦鲤疱疹病毒病是由锦鲤疱疹病毒 （KHV）引起的锦鲤、鲤鱼及其普通变种发生鳃坏死和间质性肾炎的一种高致病性和高死亡率的疾病。该病多发生在水温为18℃～28℃的春秋季节，但目前有低温下发病的趋势。该病具有高度传染性，发病率和死亡率均高达80%～100%。在锦鲤和鲤鱼的国际贸易中，由于缺乏相关的检疫制度，促使了该病在世界范围内暴发性流行，给锦鲤和鲤鱼养殖业带来了破坏性影响。 　　 1.国内外流行现状 　　自从锦鲤疱疹病毒病暴发以来，各个国家和地区几乎每年都发生。2003年以来，我国东北地区的框镜鲤和普通鲤鱼发生暴发性疾病，死亡率高达80~90%，经PCR检测为KHV阳性；近两年来，KHV检测也均为阳性。另外，有报道，近年来在菲律宾非法进入的锦鲤中检测到KHV。2008年，中国台湾地区检测KHV阳性率为7%；据2010年鱼病统计结果显示，泰国也有KHV的发生。锦鲤疱疹病毒病的全球性暴发，给锦鲤观赏业、鲤鱼养殖业以及国际贸易等造成了极大的经济损失，并引起了各国的高度重视，因此，各国家和地区应加强合作，严格控制KHV的发生与流行。 　　2.病毒研究进展 　　 2.1 KHV形态结构和理化特征 　　锦鲤疱疹病毒(KHV)属于疱疹病毒科，是直径为100～110nm的二十面体，有囊膜包裹，与其同科的鲤鱼1型疱疹病毒和叉尾?病毒之间有免疫交叉反应。病毒核表面具有螺纹样结构；核???有一个不对称的电子密集区，被认为是病毒DNA基因组构成的核蛋白。KHV在22℃左右的池塘水中至少存活4小时，并且在鱼的分泌物或池塘底泥中存活的时间可能更长。病毒对温度和酸碱度比较敏感，在35℃2天或60℃30分钟以及pH低于3或高于11的条件下，能够失去感染力。用氯仿、在25%的乙醚或0.1%的TritonX-100可迅速杀灭病毒。 　　 2.2 KHV的分类和命名 　　研究表明，KHV与疱疹病毒在进化和形态学上具有明显的相似性，但KHV的基因组比其他疱疹病毒都大。通过序列分析发现，KHV与鲤鱼1型疱疹病毒和金鱼出血性坏死疱疹病毒有较高相似性，进一步表明KHV属于疱疹病毒科。 　　目前，国际上还没有对KHV的统一命名，锦鲤疱疹病毒（KHV）又称为鲤鱼间质性肾炎及鳃坏死病毒。通过比较疱疹病毒的主要囊膜蛋白基因、衣壳蛋白基因、DNA聚合酶基因、螺旋酶基因，认为KHV与鲶鱼疱疹病毒也有相近之处，建议将KHV命名为CyHV-3。因此，对病毒的系统发育及生物学方面的研究有利于对该病毒更加准确的分类及命名。 　　 2.3 KHV基因组特征 　　KHV是线形双股DNA病毒，病毒基因组大小为295Kbp，两股基因组的末端含有22个正向重复序列；有156个开放性阅读框（ORF），8个末端重复序列；KHV平均每0.57Kbp有一个ORF，比IcHV-1稍低（0.68Kbp）；全部核苷酸的GC含量为59.2%。目前，已报道有4个分离株，即欧洲株、美国株（KHV-U）、亚洲株（KHV-J）和以色列株（KHV-I）。但在Genbank中未登录欧洲株的全基因组序列，KHV-I、KHV-J和KHV-U在基因组序列上有高度相似性，但是KHV-U与KHV-I比KHV-J更为相近。通过对三株病毒的基因组核苷酸分析认为KHV原始株最初分化为J系和U/I系，随后U/I系又分化成U和I两个分支。另外，用PCR方法可以区别亚洲株和其他三株。 　　 2.4 编码蛋白 　　KHV的156个ORF只有少数已经确定其功能。ORF81和ORF83编码主要囊膜蛋白，且主要在细胞质中表达。其中ORF81编码蛋白的分子量为28.2 KD，等电点（PI）为8.65，含有4个跨膜区，可构成主要抗原决定簇；另外，ORF81在大量表达时出现细胞核缩小及细胞从瓶壁脱落的现象。研究表明，ORF81重组蛋白的表达可作为免疫荧光和ELISA检测KHV特异性血清抗体的诊断性抗原，还可以用于抗KHV的亚单位或DNA疫苗的研究。ORF25和ORF99编码膜糖蛋白；O