【精品】第二章细菌感染实验诊断59.pptVIP

第二章细菌感染实验诊断;　 目前，临床遇到主要是条件致病菌， 引起的感染。正常菌群与病原菌的致病 性是相对的，因此，既不要轻易认为分 离出的非致病菌是污染菌，也不要轻易 认为所发现的细菌就是该感染的病原菌， 必须结合临床进行进一步的诊断。 ;第一节 临床感染性疾病 实验诊断要求 ;3.以流行病学研究为目的,要鉴定到型。 4.以了解细菌与感染的关系为目的,应 该做细致的鉴定。 ;二、诊断试验的选择;3.综合考虑试验的敏感性和特异性。 敏感性=阳性结果数/感染病人数，越高假阴性就越少。 特异性=阴性结果数/未感染病人数，越高假阳性就越少。 ;三、常用诊断流程;2.表解法： 将各种细菌及其多种特性列成矩阵表 格，使相互的区别点十分明显，便于 分析比较。此法对于相互区别比较复 杂的细菌，如肠杆菌科的初步分属。;3.数字编码鉴定法;组别;第二节 临床标本的采集 与处理;3.根据目的菌的特性用不同的方法采集 适量标本，采集量不应过少。 4.注意在不同病程采集不同部位标本。 5.采集标本时要防止传播和自身感染。;二、标本的处理;2.标本中可能含有致病菌，必须注意安全 防护。切勿污染环境。对于烈性传染病 标本运送时更要由专人运送，严格按规 定包装。;3.厌氧性标本应放在专门的运送瓶或试管 内运送，有时可直接用抽取标本的注射 器运送。 ;第三节 细菌形态学检查;4.荧光显微镜可看到发射荧光的细菌。还应用 于免疫荧光技术中。 5.电子显微镜有透射电子显微镜和扫描电子显 微镜。前者适于观察细菌内部超微结构，后 者适于对细菌表面结构及附件观察。 ;二、不染色细菌标本检查 ;三、细菌染色标本的检查;(一)常用染料; 2．酸性染料 电离后显色离子带负电荷，易与带正电荷的被染物结合。细菌都带有负电荷故不易着色。通常用来染细胞浆，而很少用于细菌的染色。常用的酸性染料有伊红、刚果红等。;3．复合染料(中性染料)及荧光染料 复合染料是碱性染料和酸性染料的 复合物，如瑞氏染料(伊红美蓝)、 姬姆萨染料(伊红天青)等；荧光染 料如荧光标记的抗体，荧光素常用 异硫氢基荧光素。这些染色常用于 某些特殊的染色技术中。;（二）常用的染色方法;1．革兰染色; 结合细菌特殊结构及排列方式，对病 原菌可进行鉴定，其结果为临床早期诊断 及治疗提供了依据。 革兰染色可为临床选择用药提供参考， 帮助临床制订有针对性的治疗方案。因为 G+菌和G-菌对抗生素敏感性不同，且致病 物质 及其作用机理也不同。;2．抗酸染色;3．荧光染色 敏感性强，效率高而且容易观察结果，在 临床细菌鉴定中有很大的实用价值。主要用于 结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌、白喉棒状杆菌 及痢疾志贺菌等的检测。 此外还有： 鞭毛染色可观察有无鞭毛、鞭毛的位置及数量， 在细菌鉴定中很重要。 异染颗粒染色镜检异染颗粒，为临床早期诊断 白喉提供依据。;第四节细菌分离培养与接种技术;（一）细菌室的符合条件;3．室内应备有消毒剂，用于试验中发生 菌液洒溅时的及时消毒处理。同时还 应备有供工作人员浸手用的盛有消毒 剂的水盆、肥皂及自来水源等。 4．室内操作台须每日用消毒剂擦洗，地 面至少一周用消毒剂擦洗1次。;5．对接收的标本、无菌器具、用过的物 品等应明显分开井放在指定位置。同 时要对用过的物品及时进行灭菌处理。 6．细菌室应有当地的气温特点的消防设 备。 ;(二)无菌实验室;3．在无菌室中一般仅限于分装无菌的 培养基及传染性强的细菌的接种， 不进行有菌标本的分离及其他操作。 4．无菌室内应仅限操作人员进人，而且 进入无菌室应着隔离衣和专用鞋，操 作时戴口罩，随时保证室内的无菌状 态。;5．条件有限的实验室，可用超净工作台 代替无菌实验室进行相应的操作。超 净工作台应选择垂直气流通风方式。 6．无菌室应配备空调设备，保证不因室 温而影响工作。;(三)基本设备和器具; 用于储存培养基、诊断用血清、抗生素 及菌种等的冰箱和冷藏柜； 用于挑取标本、接种等的接种器具，包 括接种环和接种针；制备培养基时用的pH计； 用于接种器具灭菌的火焰灯或酒精灯； 还有各种必用的平皿、试管、吸管等玻璃器 皿，以及离心机、天平等。 ;二、培 养 基; (一)培养基的组成成分;(二)培养基种类;3．鉴别培养基 利用细菌分解能力及代 谢产物的不同，在培养基中加入特定 的作用底物和指示剂，观察细菌生长 过程中分解底物所释放的