宠物源大肠杆菌中质粒介导喹诺酮类耐药基因qnrD的-中国农业科学.PDF

中国农业科学 2010,43(20):4317-4322 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2010.20.025 宠物源大肠杆菌中质粒介导喹诺酮类耐药基因qnrD的研究 1 1 2 1 1 1 1 1 1 1 朱恒乾 ，廖晓萍 ，陈朝喜 ，孙 坚 ，李 亮 ，张美君 ，刘宝涛 ，孙 迎 ，钟国光 ，刘雅红 1 2 （华南农业大学兽医学院/广东省兽药研制与安全评价重点实验室，广州 510642 ； 西南民族大学生命科学与技术学院，成都 610041 ） 摘要：【目的】对临床分离的宠物源大肠杆菌进行质粒介导喹诺酮类耐药基因qnrD的检测，并对该基因进行 序列分析和传播机制的研究。【方法】采用微量稀释法对阳性菌株进行15 种抗生素的最小抑菌浓度试验；通过PCR 对基因克隆，并对克隆产物和菌株阳性质粒进行转化；同时对菌株进行接合转移试验。【结果】从 164株宠物源大 肠杆菌中检测出 1 株 qnrD 阳性菌株（GP2009-036），GP2009-036 对 14 种兽医临床常用抗生素耐药严重，表现为 多重耐药（14 耐）；PCR产物经连接PMD19-T载体后可转化入DH5α感受态细胞中；接合转移试验成功地将质粒转 移到大肠杆菌J53中；可从GP2009-036与其转化子中抽提出阳性质粒。【结论】该qnrD 阳性菌株对临床常用抗生 素耐药严重，且阳性质粒可在病原微生物间进行水平传播，其水平传播机制可能使该基因在宠物临床上进行传播。 关键词：qnrD；大肠杆菌；质粒介导；喹诺酮；耐药 New Plasmid-Mediated Quinolone Resistance Gene qnrD Found in an Isolate of Escherichia coli from Pet Animals ZHU Heng-qian, LIAO Xiao-ping, SUN Jian, LI Liang, ZHANG Mei-jun, LIU Bao-tao, SUN Ying, ZHONG Guo-guang, LIU Ya-hong 1 ( Guangdong Provincial Key Laboratory of Veterinary Pharmaceutics Development and Safety Evaluation /College of Veterinary Medicine, South China Agricultural University, Guangzhou 510642; 2College of Life Science and Technology, Southwest University for Nationalities, Chengdu 610041 ) Abstract: 【Objective 】 The objective of this study is to detect plasmid-mediated quinolone resistance qnrD gene in clinical isolates of Escherichia coli from pet animals, analyze the sequence of this gene and study the transmission mechanism of qnrD gene. 【Method 】 Susceptibility of positive strain to 15 antimicrobial agents was d